Milieux de culture Déshydratés

Le bouillon Trypticase Soja (TSB) ou bouillon Caséine-Peptone farine de Soja-Peptone (CASO) est un milieu de culture universel exempt d'inhibiteurs et d'indicateurs pour l'isolement et la culture de bactéries, levures et moisissures aérobies exigeantes.

Le milieu est utilisé pour les tests de stérilité de produits, en tant que bouillon de pré-enrichissement ou pour le dénombrement de la flore totale aérobie en utilisant la méthode NPP dans des produits non stériles.

L'incubation se fait pendant 18 à 24 h à 35°C ou jusqu'à 7 jours pour test de stérilité à température ambiante.

Gélose de base Bacillus Cereus selon Mossel BIOKAR - 500G

La gélose sélective pour Bacillus cereus selon Mossel est utilisée pour la détection et le dénombrement des spores et formes végétatives de Bacillus cereus dans les produits alimentaires.

Composition : 
Pour 1L de milieu.

Tryptone : 10,0 g
Extrait de viande : 1,0 g
D-mannitol : 10,0 g
Chlorure de sodium : 10,0 g
Rouge de phénol : 25,0 mg
Agar agar bactériologique : 13,5 g
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25 °C : 7,2 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 44,5 g de milieu déshydraté dans 0,9 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir en flacons à raison de 90 mL.
4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir à 44-47 °C.
    
6. Dans chaque flacon de 90 mL de milieu de base, ajouter stérilement 10 mL d’émulsion stérile de jaune d’œuf avec Polymyxine B (770.005508.54).
7. Homogénéiser parfaitement.
8. Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide. 

NOTE : A la place de 10 mL d’émulsion stérile de jaune d’œuf à la polymyxine, il est possible d’ajouter 10 mL d’émulsion de jaune d’œuf (770.006608.02) et 1 mL de supplément polymyxine (supplément 770.000708.02 réhydraté avec 5 mL d’eau stérile).

Normes : NF EN ISO 7932, NF EN ISO 21871, NF EN ISO 11133.

Pour l'isolement et la détection de Pseudomonas spp.

P.aeruginosa est un indicateur valable pour le contrôle de l'éfficacité des traitements de désinfection de l'eau. Ce paramètre est actuellement utilisé comme critère dans la régulation des pataugeoires et piscines. En plus de son rôle d'indicateur de propreté, P.aeruginosa est également recherché comme pathogène opportuniste dont la transmission est souvent associée à l'eau.
CHROMagar™ Pseudomonas fournit des résultats rapides et clairs pour la détection de Pseudomonas grâce à des couleurs de colonies différentielles. 

Lecture :

• Pseudomonas incluant P.aeruginosa
  • Bleu-vert
• Autres Gram (-)
  • Mauve à violet ou inhibé
• Bactéries Gram (+)
  • Majoritairement inhibé

Orange serum agar est utilisé pour l’isolement, la culture et le dénombrement des germes résistants aux acides, responsables de l’altération des jus de fruits et des concentrés de jus de fruits en particulier d’agrumes.

Préparation :
Dissoudre 42 g/l. Autoclaver 15 minutes à 115 °C.
Incuber 3 à 5 jours à température optimale.

Composition :
Peptone de caséine : 10,0
Extrait de levure : 3,0
Extrait d'orange : 5,0
D (+) glucose : 4,0
Hydrogénophosphate dipotassique : 3,0
Agar agar : 17,0
pH final 5,5 ± 0,1

La gélose SIMMONS CITRATE est recommandée pour la différenciation et l'identification des Enterobactéries sur le base d'utilisation du citrate.

Gélose COEUR-CERVELLE

DESCRIPTION:

La gélose cœur-cervelle convient à la culture d’une grande variété de microorganismes incluant les levures et les moisissures. Après adjonction de sang de mouton, ce milieu est utilisé pour la culture des bactéries exigeantes dans le domaine vétérinaire. Après addition de gentamicine et de chloramphénicol, on obtient un milieu sélectif convenant à la culture des champignons pathogènes à partir de prélèvements fortement contaminés par des bactéries et des moisissures saprophytes. En raison de sa teneur en glucose, ce milieu ne convient pas pour la caractérisation des hémolyses.

CONDITIONNEMENT

Milieu déshydraté :
BK029HA - Flacon de 500 g

Le bouillon de Rothe est un milieu utilisé pour la recherche et le dénombrement des Streptocoques fécaux dans les eaux d’alimentation, les produits alimentaires.

Préparation:

Dissoudre 35,6 g/l (simple concentration) ou 71,2 g/l (double concentration). Autoclaver 15 minutes à 120 °C.
Ensemencer 1 ml en simple concentration, 10 ml en double concentration. Incubation 24 et 48 h à 37 °C.

Composition :
Peptone de caséine : 20,0
Glucose : 5,0
Chlorure de sodium : 5,0
Phosphate bipotassique : 2,7
Phosphate monopotassique : 2,7
Azide de sodium : 0,2
pH final 6,8 ± 0,2 à 25 °C

Le bouillon Muller Kauffmann Tétrathionate est utilisée pour enrichir les salmonelles provenant des aliments et des échantillons environnementaux avant l'isolement sélectif.
Ce pré-enrichissement inhibe les bactéries concurrentes aux salmonelles pour favoriser uniquement leurs développements.
Plusieurs agents sélectifs composent ce bouillon Muller Kauffmann Tétrathionate comme oxbile, levert brillant, la novobiocine.

Les sources de carbone, d'azote, de vitamines et les minéraux proviennent des peptones et l'extrait de boeuf.
Oxgall et levert brillant sont les agents sélectifs qui inhibent les bactéries gram-positifs et les autres bactéries gram-négatifs.
La source de souffre est apportée par le thiosulfate de sodium.

Une fois isolé sur un milieu de culture, les Salmonella spp. produiront des colonies rouges avec une bonne croissance.

Composition pour 1 Litre :
- Extrait de boeuf : 5.0 g
- Peptone : 10.0 g
- Chlorure de sodium : 3.0 g
- Carbonate de calcium : 45.0 g
- Thiosulfate de sodium : 38.1 g
- Oxgall : 4.7 g

pH 7.0 +/-0.2 à 25°C

GLUCOSE TRYPTONE GELOSE OXOID CM0127B-500G

Le milieu Glucose Tryptone Gelose est recommandé pour la numération sur boîte de Petri de l'eau mais peut également être utilisé pour la détection des bactéries thermophiles dans les produits laitiers. Ce milieu est recommandé par la tandard Methods Committee de l'American Public Health Association après dilution de l'échantillon de lait au 1/10. (1g de lait en poudre pour 9mL d'eau distillée stérile.)

Composition en g/L :

Lab-Lemco en poudre: 3.0

Tryptone: 5.0

Glucose: 1.0

Agar: 15.0

pH 7.0 ± 0.2

Agarose à basse température de gélification

BioReagent, pour la biologie moléculaire.
L'agarose est un composant des polysaccharides de la paroi cellulaire des algues rouges marines. Il a une propriété gélifiante élevée et est hydrophile.