Milieux de culture

Le bouillon Thioglycollate est utilisé pour la culture et l'isolement de bactéries anaérobies et microaérophiles obligatoires et facultatives et pour les simulations de processus aseptiques. 

Chaque dose permet de supplémenter 500 ml d’agar ou bouillon Palcam Merck.

A 500 ml d’agar ou bouillon Palcam Merck ajouter une dose de supplément reconstitué avec 1 ml d’eau distillée stérile.

Composition :
Sulfate de Polymyxine B : 0,005
Ceftazidime : 0,010
Acriflavine : 0,0025

Le XLT 4 agar est un milieu pour l’isolement et la différenciation des entérobactéries pathogènes, particulièrement des Salmonelles.

Préparation :
Dissoudre 59 g/litre d'eau distillée. Ajouter 4,6 ml de Tergitol 4 et chauffer au bain-marie. Refroidir à 50 °C et couler en boîtes. Innoculer en surface.
Incuber à 35 °C/18 à 24 h.

Lecture :
Les Salmonelles H 2 S-positives apparaissent en noir sur fond violet.

Composition :
Protéose peptone : 1,6
Extrait de levure 3,0
L-Lysine : 5,0
Xylose : 3,75
Lactose : 7,5
Saccharose : 7,5
Ammonium Fer III citrate : 0,8
Sodium thiosulfate : 6,8
Sodium chlorure : 5,0
Rouge de phénol : 0,08
Agar agar : 18
pH final 7,4 ± 0,2 à 25 °C

La gélose mCCD est une gélose modifiée à la cefopérazone, au charbon et au désoxycholate.
La gélose mCCD permet la détection et le dénombrement de Campylobacter spp. dans les denrées alimentaires et les aliments pour animaux
ainsi qu'à partir d'échantillons environnementaux et d'autres matériaux.
Ce milieu de culture est conforme aux spécifications données par la norme EN ISO 10272 et la FDA-BAM.

Les apports du milieu mCCD :
- Les extraits de viande et des digestions enzymatiques de tissus d'animaux et de caséine apportent les sources d'azote.
- La combinaison de charbon actif, de sulfate de fer (II) et du pyruvate de sodium est utilisé pour absorber les radicaux des peroxydes qui pourraient être inhibiteurs de la Campylobacter microaérophilique.
- Les agents sélectifs : désoxycholate, cefoperazone et amphotéricine B, permettent d'inhiber la flore bactérienne et fongique.

Composition du milieu mCCD :
- Extrait de viande : 10 g/L
- Digestion enzymatique de tissus animal : 10 g/L
- Digestion enzymatique de caséine : 3 g/L
- Charbon actif : 4 g/L
- Chlorure de sodium : 5 g/L
- Desoxycholate de sodium : 1 g/L
- Pyruvate de sodium : 0,25 g/L
- Sulfate de fer II : 0,25 g/L
- Agar : 8 à 18 g/L
-pH 7,4 +/-0,2 à 25°C

Obtenue par digestion trypsique.

Supplément sélectif de Bacillus cereus Merck - 10 tubes

Ces tubes de lyophilisat permettent la préparation de 5,0 L d’agar Sélectif Cereus selon MOSSEL (MYP agar).

Composition : 

Polymyxine B : 50.000 UI

Préparation :(agar Sélectif Cereus selon MOSSEL)

1. Ajouter 21,5 g dans 450 ml de l’eau déminéralisée et autoclaver 15 min. à 121 °C.
2. Laisser refroidir le milieu de culture à 45–50 °C.
3. Le supplément est dissous en ajoutant 1 ml d’eau déminéralisée stérile et mélangé uniformément au milieu nutritif de base refroidi.
4. Puis ajouter dans le milieu nutritif 50 ml d’émulsion de jaune d’œuf amenée à température ambiante, répartir de façon homogène et couler en boîtes.

Le lait écrémé est un ingrédient pour milieu de culture.

L'esculine est un additif pour vos milieux de culture en microbiologie.
L'esculine sera à ajouter pour les bactéries qui hydrolysent l'esculine.
Les enterococcus utilisent l'esculine et la transforme en esculetine formant un précipité noir.
Ce précipité est le résultat entre les ions fer III et l'esculétine.

Supplément Listeria Chromocult® Merck - 10 vials

Le supplément d'enrichissement pour gélose Chromocult® Listeria est une suspension homogène et stérile de L-α-phosphatidylinositol dans de l'eau distillée.

Mode d'action

La différenciation de Listeria monocytogenes des autres Listeria spp. est obtenu grâce à la production d'une phospholipase C spécifique du phosphatidylinositol (PI-PLC). Listeria monocytogenes hydrolyse le substrat purifié spécifique ajouté au milieu produisant un halo opaque autour des colonies. La plupart des Listeria ivanovii produisent également un halo opaque autour des colonies après 48 h d'incubation.

Préparation

1. Une bouteille du supplément d'enrichissement stérile est chauffée dans un bain-marie à 48-50 °C.
2. Juste après l'ajout du supplément sélectif Chromocult® Listeria (4 ml), ajoutez tout le contenu du flacon de supplément d'enrichissement Chromocult® Listeria (20 ml) de manière aseptique à 480 mL de gélose sélective Chromocult® Listeria fondue refroidie à 45-50 °C.
3. Remuez doucement pendant cet ajout pour une répartition homogène des deux suppléments.

Normes : ISO 11290 et EN ISO 11133.

RAPPAPORT VASSILIADIS MODIFIE SEMI-SOLIDE BASE MERCK-500G

Principe du MSRV semi-solide :
L’efficacité bactériologique est fondée sur la capacité des Salmonelles à migrer de façon sélective dans le milieu. Les Salmonelles produisent un halo opaque, témoin de la culture.

Préparation :
Dissoudre 31,6 g/litre d’eau distillée ou déminéralisée. Porter à ébullition lentement en agitant jusqu’à dissolution complète. Maintenir l’ébullition 2 min. Ne pas autoclaver. Répartir stérilement en flacons de 100 ml. Refroidir à 48 °C. Ajouter le supplément sélectif novobiocine Merck 9874. Couler en boîtes de Pétri.

Mode d'emploi :
Ensemencer 3 gouttes (0,1 ml) de bouillon de pré-enrichissement ou d’enrichissement sélectif en trois spots séparés à la surface d’une même boîte de milieu. Incuber à 42 °C/20 à 24 h.

Lecture :
Les colonies blanchâtres au point d’innoculation, entourées d’un halo opaque confirment la présence de Salmonelles.

Composition :
Tryptone : 4,59
Hydrolysat acide de caséine : 4,59
NaCI : 7,34
Potassium dhydrogénophosphate : 1,47
Chlorure de magnésium anhydre : 10,93
Vert malachite (oxalate) : 0,037
Agar agar : 2,70
pH final : 5,4 ± 0,2 à 25 °C