Milieux de culture Déshydratés

Le Muller Kauffmann est un bouillon au tétrathionate pour l’enrichissement des Salmonelles à partir d’échantillons de produits alimentaires selon la norme ISO 6579.

Préparation :
Dissoudre 89,5 g dans 1 litre d’eau déminéralisée. Porter à ébullition 5 minutes. Ne pas autoclaver. Laisser refroidir à 45 °C et ajouter à 1 l de milieu :
- 20 ml d’une solution iodo-iodurée contenant 5 g d’iodure de potassium et 4 g d’iode.
Incubation :
Après avoir introduit 1 ml de pré-enrichissement dans 10 ml de MKTTn, incuber de 21 à 27 heures à 36-38 °C.

Composition :
Extrait de viande : 4,3
Peptone de caséine : 8,6
Chlorure de sodium : 2,6
Carbonate de calcium : 38,7
Thiosulfate de sodium déshydraté : 30,5
Bile de boeuf séchée : 4,78
Vert brillant : 0,0096
Novobiocine : 0,04
pH final 8,2 ± 0,2 à 25 °C

La peptone de viande granulée est utilisée comme substrat nutritif dans les milieux de fermentation et de culture en microbiologie.

Note d'analyse :

Apparence : Granulat légèrement brun-jaune.
Identité (NIR) : passe le test
Valeur pH (5%; eau) : 6,5 - 7,5
Azote total (N) (Kjeldahl) : 11,0 - 14,0%
Azote aminé (sous forme de N) : 3,4 - 5,0%
Nitrite (NO₂) : passe le test
Cendres sulfatées (800°C) : ≤ 17,0%
Perte au séchage (105°C) : ≤ 6,0%
Aptitude à la microbiologie : passe le test

Le milieux de culture KF Streptocoques Agar permet de détecter et de dénombrer des entérocoques ou( Streptocoques fécaux) dans les denrées alimentaires, les eaux et autres...

Les apports du milieu KF Streptocoques Agar :
- Le maltose et le lactose favorisent la croissance des entérocoques, en les métabolisant avec formation d'acide.
- L'azoture de sodium permet d'inhiber les autres bactéries hors Streptocoques.
- L'indicateur de pH le violet de bromocrésol va changer de couleur lors de la production d'acide lié à la métabolisation du lactose et du maltose.
- Le TTC est réduit par les entérocoques pour former du formazan rouge donnat des colonies rouges.

Composition du milieu KF :
- Proteose peptone : 10.0 g/L
- Extrait de levure : 10.0 g/L
- Chlorure de sodium : 5.0 g/L
- Sodium glycerophosphate : 10.0 g/L
- Maltose : 20.0 g/L
- Lactose : 1.0 g/L
- Sodium azide: 0,4 g/L
- Violet de Bromocrésol : 0.015 g/L
- Agar : 15.0 g/L

Milieu sélectif Pseudomonas CFC agar est utilisé pour le dénombrement des Pseudomonas dans les aliments.
Milieu sélectif Pseudomonas CN agar pour le dénombrement des Pseudomonas dans les eaux.

Préparation :
Dissoudre 24,2 g/500 ml. Ajouter 5 ml de glycerol. Porter à ébullition. Autoclaver 15 minutes à 121 °C. Refroidir à 50 °C et ajouter stérilment une dose de supplément sélectif (CFC ou CN) Oxoïd ou Merck. Etalement en surface de 0,5 à 1 ml d'échantillon.
Incubation à 25 °C/44 h ± 4 h.

Composition :
Peptone de gélatine : 16,0
Hydrolisat de caséine : 10,0
Potassium sulfate : 10,0
Magnésium chlorure : 1,4
Agar agar : 11,0
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C

Bouillon Sabouraud à 2% de glucose Merck - 500G

Le bouillon Sabouraud 2% dextrose est utilisé pour la culture et l'isolement des levures et des moisissures ainsi que pour le test d'absence de Candida albicans.

La concentration élevée de dextrose en plus du pH bas favorise la croissance, la formation de spores (Conidies et Sporanges) ainsi que la formation de pigments de levures et de moisissures. La croissance des bactéries est inhibée.

Préparation :

1. Mettre en suspension 30 g/L.
2. Distribuer dans des récipients.
3. autoclaver 15 min à 121 ° C.

L'aspect du bouillon est clair et brun jaunâtre.

Composition : 

Peptone de caséine : 5 g/L
Peptone de viande : 5 g/L
D (+) - Glucose (= Dextrose) : 20 g/L

pH : 6,9 ± 0,2 à 25°C.

Readycult® Enterocoques 100 - 20 tests

Le test Readycukt® Enterocoques 100 est un bouillon d’enrichissement sélectif pour la détection des Entérocoques et Streptocoques du groupe D dans l’eau.

Mode d'action :

Le mélange de peptone garantie la pousse rapide des Entérocoques. L’azide de sodium inhibe largement la flore accompagnante, spécialement les bactéries gram-négatives. L’enzyme caractéristique des Entérocoques, la β-D-GIucosidase, scinde le X-GLU, substrat chromogène, en produisant une intense coloration bleu-vert du bouillon.

Composition :

Peptones : 0,86 g/dose
Chlorure de sodium : 0,64 g/dose
Azide de sodium : 0,06 g/dose
X-GLU : 0,004 g/dose
Tween® 80 : 0,22 g/dose

Préparation :

1. . Ajouter 100 ml d’échantillon d’eau dans un flacon transparent stérile d’une capacité minimale de 120 ml.
   Si l’échantillon est conservé à une température inférieure à +25 °C, I’examen doit débuter dans les 6 heures. Exceptionnellement l’échantillon peut être conservé entre +2 et +8 °C (réfrigération) pour un maximum de 24 heures.
2. Prendre une dose et la tapoter légèrement pour s’assurer que les granulés sont bien dans le fond. Arracher l’opercule.
   Attention: ne pas toucher l’ouverture afin d’éviter toute contamination!
3. Verser le contenu de la dose dans le flacon d’eau, le fermer et l’agiter jusqu’a la complete dissolution des granulés.
4. Incuber le flacon à 35–37°C jusqu’à 24 heures.
   Si l’incubation est réalisée à température ambiante (+20–25°C) prolonger jusqu’à 48 heures.

Solution Salmosyst :
- un pré-enrichissement à l’aide du Salmosyst bouillon de base à 37 °C/6 à 8 h

Avantages :
- gain de temps : la solution Salmosyst permet de réduire le temps global (pré-enrichissement + enrichissement) à 24-30 heures
- simplicité d'emploi : après pré-enrichissement de 25 g d’échantillon dans 225 ml de Salmosyst bouillon de base, (37 °C/6 à 8 h) et ajouter 1 comprimé de Salmosyst supplément sélectif à 10 ml de bouillon de pré-enrichissement (37 °C/18 à 22 h)

Suggestion Humeau :
Association Samosyst-milieu de Rambach agar : pré-enrichissement Salmosyst+enrichissement Salmosyst=18 à 24 h. Durée totale de la recherche de 50 heures.

Composition :
Peptone de caséine : 5,0
Peptone de viande : 5,0
Chlorure de sodium : 5,0
Carbonate de calcium : 10,0
Après dissolution un léger précipité dû au carbonate de calcium apparait.

Bouillon EC (Escherichia coli)

• Solubilité: 74 g/l 
• Valeur de pH: 6.7 - 7.1 (37 g/l, H₂O, 25 °C) (après autoclavage)

"Slanetz et Bartley" est une gélose sélective pour le dénombrement des Streptocoques fécaux dans les eaux, sur membranes filtrantes.

Dissoudre 41,4 g/l. Ne pas autoclaver. Stériliser sous vapeur fluente pendant 20 minutes. Incubation 24 h ou 48 h à 37 °C.

Composition :
Peptone de caséine : 20,0
Extrait de levure : 5,0
Glucose : 2,0
Phosphate disodique : 4,0
Azide de sodium : 0,4
Agar agar : 10,0
T.T.C : 0,1
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C

Bouillon de MacCONKEY.

Milieu de culture sélectif utilisé comme test présomptif pour les bactéries E. coli et coliformes et pour déterminer le titre en E. coli ou coliformes du lait, de l'eau et d'autres matières selon MacCONKEY et HILL (1901).