Milieux de culture Déshydratés

Eau peptonée pour l’identification d’Escherichia coli par la production de l’indole.

Préparation:

Dissoudre 15 g/l. Autoclaver 15 minutes à 120 °C. Incubation 12 à 24 h à 37 °C .

Révélation au moyen du réactif de Kovacs : la présence d’indole est indiquée par l’apparition d’une couleur rouge de la phase alcoolique du réactif, ajouté à raison de 0,5 ml par tube.

Composition :
Peptone de caséine : 10,0
Chlorure de Sodium : 5,0
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C

La gélose EMB (Eosine Méthylène Bleu), préconisée originellement par Levine, est utilisée pour différencier les entérobactéries (notamment Escherichia coli et Enterobacter aerogenes) dans les produits pharmaceutiques, les produits cosmétiques, les produits alimentaires et les eaux.
Elle est également utilisée comme milieu de confirmation d’Escherichia coli en cosmétiques.

La formule-type répond à la composition définie dans la norme NF EN ISO 21150.

La gélose mannitol-sel (Mannitol Salt Agar) est utilisée pour l’isolement sélectif des staphylocoques et la détection des Staphylococcus aureus à partir d'échantillons cliniques.

PRINCIPE

La Mannitol Salt Agar est une préparation élaborée par Chapman pour différencier les staphylocoques coagulase positifs (ex. Staphylococcus aureus) des staphylocoques coagulase négatifs. Elle est utilisée pour isoler les staphylocoques provenant d’échantillons cliniques, de cosmétiques et pour les tests de dénombrement des microorganismes. Les peptones et l’extrait de bœuf présents dans la Mannitol Salt Agar apportent les éléments nutritifs essentiels. La concentration à 7,5 % du chlorure de sodium entraîne l’inhibition partielle ou complète des organismes bactériens autres que les staphylocoques. La fermentation du mannitol, signalée par un changement de l’indicateur au rouge de phénol, permet de différencier les espèces de staphylocoques. Les staphylocoques coagulase positifs (ex. Staphylococcus aureus) produisent des colonies de couleur jaune et une coloration jaune du milieu environnant, tandis que les staphylocoques coagulase négatifs produisent des colonies de couleur rouge et aucun changement de teinte de l’indicateur au rouge de phénol.

BD Milieu de culture déshydraté Difco™ : Base de gélose au sang Columbia, Hémolyse améliorée

Le milieu liquide à base de thioglycollate (FTM) est utilisé pour les tests de stérilité des produits biologiques et pour la culture des anaérobies, des aérobies et des microaérophiles. 

POMME DE TERRE GLUCOSE GELOSE BK 095-500G

Gélose glucosée de pomme de terre pour l’isolement, la culture et le dénombrement des Levures et Moisissures notamment dans les produits alimentaires.

Complément : acide tartrique à 10%.

Dissoudre 39 g/l. Autoclaver 20 minutes à 115 °C. Au moment de l’emploi ajouter 10 ml d’acide tartrique à 10% pour amener le pH à 3,5.

Composition :
Extrait de pomme de terre : 4,0
Glucose : 20,0
Agar agar : 15,0
pH final 5,6 ± 0,2

BD Gélose Difco™, technique

Utilisée dans la préparation de milieu de culture microbiologique. La gélose BD™ Difco™, technique est un agent solidifiant avec des paramètres de contrôle de qualité plus larges que d’autres géloses bactériologiques. Cependant, la solubilité, la température de gélification et la solidité sont soigneusement surveillées afin de permettre son utilisation.

Le lait écrémé est utilisé pour la préparation de milieux de culture microbiologiques. Le milieu de lait écrémé peut être utilisé pour la culture et la différenciation de micro-organismes dans les aliments sur la base de la coagulation et de la protéolyse de la caséine.

Incuber les tubes avec des bouchons serrés pour les Clostridia et des bouchons desserrés pour les autres organismes, à 35° ± 2°C et lire à différents intervalles pendant 7 jours pour vérifier la croissance et les réactions.

L'Oxford Listeria agar est un milieu recommandé pour la détection de Listeria monocytogenes à partir d’échantillons cliniques et alimentaires.

Préparation :
Dissoudre 29,25 g dans 500 ml d’eau distillée. Porter à ébullition jusqu’à dissolution. Autoclaver 15 min à 121 °C. Refroidir à 50 °C et ajouter le supplément sélectif pour agar Oxford. Bien mélanger.
Incubation : 48 h à 37 °C.

Composition :
Gélose Columbia : 39,0
Esculine : 1,0
Citrate ammoniacal ferrique : 0,5
Chlorure de lithium : 15,0
pH final 7,0 ± 0,2

La gélose Mueller Hinton est recommandée pour les tests de sensibilité aux antibiotiques des bactéries communes à croissance rapide par la méthode de diffusion des disques imbibés.

Le milieux est sous forme déshydratée, il doit être reconstituer avec de l'eau purifiée à hauteur de 38 g par litre.