Milieux de culture Suppléments

Antisérums Ogawa Vibrio Cholerae Difco™

L’antisérum Ogawa Vibrio Cholerae est recommandé pour réaliser les tests d’agglutination sur lame servant à l’identification et au sérotypage de Vibrio cholerae.

Préparation :

Utiliser le Difco Vibrio Cholerae Antiserum Poly pour tester les isolats de V. cholerae présomptifs. Poursuivre le test avec le Difco Vibrio Cholerae Antiserum Ogawa et le Difco Vibrio Cholerae Antiserum Inaba.

1. Déposer 1 goutte du Difco Vibrio Cholerae Antiserum à tester sur une lame à agglutination.
2. A l’aide d’un ensemenceur, transférer une pleine anse de culture bactérienne à analyser dans la goutte d’antisérum et bien mélanger.
3. Agiter pendant 1 min par un mouvement de rotation de la lame, puis observer s’il se produit une réaction d’agglutination.

Le supplément bouillon Fraser est utilisé avec la base bouillon Fraser dans l’enrichissement sélectif et la détection de Listeria.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

La différenciation de Listeria des autres bactéries est facilitée en incluant le citrate d’ammonium ferrique (Difco™ Fraser Broth supplement) dans le milieu final. Puisque toutes les espèces de Listeria hydrolysent l’esculine, l’ajout d’ions ferriques dans le milieu détectera la réaction. Un noircissement du milieu par les cultures contenant des hydrolysats bactériens est le résultat de la formation de la 6,7-dihydroxycoumarine (esculétine) qui réagit avec les ions ferriques.

REACTIFS

Formule approximative pour 10mL
Citrate d’ammonium ferrique : 0,5g

La solution TTC 1% Difco™ (Triphenyltetrazolium Chloride) est prête à l’emploi pour la préparation de milieu de culture.

La solution TTC 1% est préparée à partir de 2,3,5 triphenyltetrazolium chloride destinée à la microbiologie. Elle est utilisée comme un indicateur redox dans les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Chapman a expliqué que l’ajout de TTC à la gélose Tergitol™ permettait la détection et la confirmation de E. coli après seulement 10 heures d’incubation. Chapman a aussi expliqué que la gélose Tergitol 7 avec ajout de TTC donnait un milieu sélectif pour la détection et l’isolement de Candida albicans. Chapman ajoutait du TTC, Tergitol 7 et du pourpre de bromocrésol à la gélose Sabouraud au Malt pour l’isolement et l’identification de C. calbicans et autre champignon. Pagao, Levin et Trejo incorporaient du TTC dans la base Pagano Levin pour la détection et l’isolement des espèces de Candida.

Slanetz et Bartley utilisaient le TTC dans la gélose m-Enterococcus pour l’énumération des entérocoques. Sur ce milieu les colonies apparaissent de couleur rose à marron foncé. Kenner, Clark et Kabler utilisaient le TTC avec la gélose KF Streptococcus et le bouillon pour détecter et énumérer les streptocoques à la surface de l’eau.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

La solution TTC 1% est utilisée comme un indicateur redox pour les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Elle est incolore dans sa forme oxydée et est réduite en triphénylformazan par des systèmes réducteurs. La formation du formazan est une réaction irréversible. Une fois que le microorganisme réduit l’indicateur, la couleur rouge persiste.