Milieux de culture Suppléments

La solution TTC 1% Difco™ (Triphenyltetrazolium Chloride) est prête à l’emploi pour la préparation de milieu de culture.

La solution TTC 1% est préparée à partir de 2,3,5 triphenyltetrazolium chloride destinée à la microbiologie. Elle est utilisée comme un indicateur redox dans les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Chapman a expliqué que l’ajout de TTC à la gélose Tergitol™ permettait la détection et la confirmation de E. coli après seulement 10 heures d’incubation. Chapman a aussi expliqué que la gélose Tergitol 7 avec ajout de TTC donnait un milieu sélectif pour la détection et l’isolement de Candida albicans. Chapman ajoutait du TTC, Tergitol 7 et du pourpre de bromocrésol à la gélose Sabouraud au Malt pour l’isolement et l’identification de C. calbicans et autre champignon. Pagao, Levin et Trejo incorporaient du TTC dans la base Pagano Levin pour la détection et l’isolement des espèces de Candida.

Slanetz et Bartley utilisaient le TTC dans la gélose m-Enterococcus pour l’énumération des entérocoques. Sur ce milieu les colonies apparaissent de couleur rose à marron foncé. Kenner, Clark et Kabler utilisaient le TTC avec la gélose KF Streptococcus et le bouillon pour détecter et énumérer les streptocoques à la surface de l’eau.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

La solution TTC 1% est utilisée comme un indicateur redox pour les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Elle est incolore dans sa forme oxydée et est réduite en triphénylformazan par des systèmes réducteurs. La formation du formazan est une réaction irréversible. Une fois que le microorganisme réduit l’indicateur, la couleur rouge persiste.

Supplément sélectif Novobiocine pour l'isolement des Salmonelles et d'Escherichia coli O157

La novobiocine est utilisée comme supplément sélectif dans plusieurs applications :
- Dans le bouillon Muller Kauffmann, le bouillon MKTTn et la gélose MSRV pour l'isolement sélectif des salmonelles mobiles.
- Et dans le bouillon d’enrichissement caséine-soja modifié (mTSB) pour la recherche des Escherichia coli O157. 

Préparation:

- Reprendre le lyophilisat en y ajoutant aseptiquement 5 mL d'eau distillée stérile.
- Agiter le flacon plusieurs fois de façon à assurer une complète dissolution, tout en évitant la formation de mousse.

Composition:

- Novobiocine : 10,0 mg

Gélose OXFORD

DESCRIPTION:

La gélose Oxford est un milieu sélectif utilisé pour l’isolement et la détection de Listeria monocytogenes et des autres Listeria dans les produits alimentaires, même fortement contaminés.
Le milieu peut être utilisé comme second milieu au choix dans le cadre de la méthode de recherche de Listeria monocytogenes en microbiologie des aliments (NF EN ISO 11290-1).

CONDITIONNEMENT

Milieu déshydraté :
BK110HA - Flacon de 500 g

Supplément pour gélose Oxford (CCCFA) :
BS00308 - 10 flacons qsp 500 mL

Le supplément bouillon Fraser est utilisé avec la base bouillon Fraser dans l’enrichissement sélectif et la détection de Listeria.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

La différenciation de Listeria des autres bactéries est facilitée en incluant le citrate d’ammonium ferrique (Difco™ Fraser Broth supplement) dans le milieu final. Puisque toutes les espèces de Listeria hydrolysent l’esculine, l’ajout d’ions ferriques dans le milieu détectera la réaction. Un noircissement du milieu par les cultures contenant des hydrolysats bactériens est le résultat de la formation de la 6,7-dihydroxycoumarine (esculétine) qui réagit avec les ions ferriques.

REACTIFS

Formule approximative pour 10mL
Citrate d’ammonium ferrique : 0,5g

C'est une émulsion stabilisée stérile de plasma de lapin contenant du fibrinogène à utiliser dans la base d'agar de Baird Barker RPF. (réf.
55015010054,). Le milieu complet répond aux normes de microbiologie des aliments NF EN ISO 6888-2, NF EN ISO 6888-3 et NF V08-057-1. Elle répond aussi à la norme NF T90-412 utilisée pour le contrôle des eaux. 

Principe : Le milieu contient 3 inhibiteurs de flore secondaire, le chlorure de lithium, le tellurite de potassium ainsi qu'une la concentration importante en glycine. Les staphylocoques à coagulase positive sont caractérisés sur gélose RPF par la formation de colonies grises ou noires entourées d'un halo opaque de fibrine net, stable et bien visible.

Préparation:

Ajouter 10ml d'eau stérile. Agitez jusqu'à complète dissolution.

Sérum de cheval Supplément 

Le sérum de cheval normal est souvent utilisé comme agent bloquant ou pour le contrôle négatif dans les immunoessais.

Chaque flacon permet de supplémenter 500 ml de milieu d'Oxford agar.

A 500 ml d'Oxford agar, ajouter stérilement le contenu d'un flacon de supplément SR 140 reconstitué avec 5 ml d'éthanol/eau distillée stérile à parties égales.

Composition :
Cycloheximide : 0,200
Colistine (sulfate) : 0,010
Acriflavine : 0,0025
Cefotetan : 0,001
Fosfomycine : 0,005

C'est un supplément liquide de glycérol pur nécessaire pour la fabrication de plusieurs milieux de cultures tels que:

Milieu LOWENSTEIN JENSEN (ref: 550.100005.98) ; milieu Middlebrook (ref: 550100006.38) ; PSEUDOMONAS gélose( ref 550.610071.02) ; gélose cétrimide (ref: 550.610041.54) et tous les autres milieux de culture nécessitant l'ajout de glycérol.

C'est un supplément lyophilisé nécessaire pour la fabrication du milieu V.C.A.T (Vancomysine, Colistine, Amphotericine B et Trimethoprim)

Le milieu complet est utilisé dans le milieu sélectif des Neisseria spp grâce aux multiples antibiotiques.

PRÉPARATION :

Reconstituer à l'aide de 4mL d'un mélange 1:1 eau distillée stérile/acool éthylique stérile.

Ajouter le contenu du flacon dans 500mL de milieu G.C (ref: 550.100005.46)

Stériliser puis ajouter 5% de sang de cheval défibriné cuit (chocolat) et 1 flacon Vitalex (ref: 550.080000.61)

C’est un supplément lyophilisé de Chlorure de triphényltétrazolium nécessaire pour la fabrication de plusieurs milieux de cultures tels que :

Milieu Azide Maltose (ref: 550.610154.54) ; milieu Barnes (ref: 550.100004.30) ; milieu Slanetz bartley( ref 550.610134.54) ; gélose Tergitol (ref: 550.610184.54) 

PRINCIPE:

Le T.T.C est un indicateur coloré de type redox. Il est utilisé pour la détection d'Escherichia coli et des coliformes qui forment un précipité de triphénylformazane rouge persistant.