Milieux de culture Déshydratés

La gélose à l’éosine et au bleu de méthylène est un milieu différentiel légèrement sélectif servant à l’isolement et à la différenciation de bacilles entériques à Gram négatif (Enterobacteriaceae et divers autres bâtonnets Gram-négatifs).

La EMB agar contient des colorants tels que l’éosine Y et le bleu de méthylène qui inhibent les bactéries Gram-positives jusqu’à un certain point. Ces colorants servent aussi d’indicateurs différentiels par réaction à la fermentation du lactose et/ou du saccharose due aux microorganismes. Les coliformes produisent des colonies de couleur bleu-noir tandis que les colonies de Salmonella et de Shigella sont incolores ou de couleur ambrée transparente. Les colonies de Escherichia coli peuvent présenter un aspect caractéristique vert métallisé brillant dû à la fermentation rapide du lactose.

BD Milieu de culture déshydraté Difco™ : Gélose xylose lysine désoxycholate (XLD)

BD Milieu de culture déshydraté Difco™ : bouillon Dey/Engley (D/E) neutralisant

Tests de l’efficacité des désinfectants et assainisseurs. Milieu de culture déshydraté Difco™ : Le bouillon de neutralisation Dey/Engley (D/E) fait partie d’une vaste gamme de milieux déshydratés.

Difco™ LB bouillon Miller

Ce bouillon est utilisé pour maintenir et propager Escherichia coli dans les procédures de biologie moléculaire.

C'est un milieu riche en nutriments conçus pour la croissance de cultures pures de souches recombinantes. E.Coli croît plus rapidement parce qu'ils fournissent aux cellules des acides aminés, précurseurs des nucléotides, vitamines et d'autres métabolites que le micro-organisme doit sinon synthétiser.

Composition (pour 1L de préparation):

Tryptone: 10,0g

Extrait de levure: 5,0g

Chlorure de sodium: 10,0g

La gélose d'isolement Pseudomonas est utilisée avec du glycérol (à ajouter) pour isoler les bactéries Pseudomonas et différencier les Pseudomonas aeruginosa des autres Pseudomonas sur la base de la formation de pigments.

La gélose Mueller Hinton II (Mueller Hinton II Agar) est utilisée dans la méthode standardisée de test par diffusion sur disque pour déterminer la sensibilité des isolats cliniques des organismes aérobies à croissance rapide vis-à-vis des agents antimicrobiens.

La méthode Bauer-Kirby consiste à diffuser au travers d’une gélose des substances antimicrobiennes imprégnées sur des disques de papier. Des méthodes plus anciennes, qui faisaient appel à des disques aux concentrations antimicrobiennes faibles et élevées, fondaient l’interprétation des résultats sur la présence ou l’absence de zones d’inhibition. Aujourd’hui, ce procédé s’appuie sur des disques à concentration constante d’agents antimicrobiens et les diamètres des zones sont comparés aux concentrations minimales d’inhibition (CMI). Dans le mode opératoire du test, une suspension standardisée de l’organisme est écouvillonnée sur toute la surface du milieu. Des disques de papier imprégnés d’une quantité déterminée d’antibiotique ou d’autres agents antimicrobiens sont alors placés contre la surface du milieu. La boîte de Pétri est incubée, puis les zones d’inhibition qui apparaissent autour de chaque disque sont mesurées. La réaction de l'organisme est déterminée comme sensible (S), intermédiaire (I) ou résistante (R) à un agent en comparant les diamètres des zones observées à ceux répertoriés dans les tableaux 2A à 2D figurant dans le document CLSI M100 (M2). La réaction de l'organisme est déterminée comme sensible (S) ou résistante (R) à un agent en comparant les diamètres des zones observées à ceux répertoriés dans les tableaux des concentrations critiques fixées par l'EUCAST. Divers facteurs ont été identifiés comme influençant les tests de sensibilité par diffusion sur disque. Ce sont notamment le milieu et l’excès d’humidité à sa surface, la profondeur de la gélose, l’activité des disques, la concentration de l’inoculum, le pH et la production de ß-lactamase par les microorganismes testés.

La Mueller Hinton Agar est un milieu standard utilisé lors des tests de sensibilité des aérobies à croissance rapide ou des organismes bactériens anaérobies facultatifs, par exemple les staphylocoques, les entérocoques, la famille des Enterobacteriaceae et les bâtonnets aérobies Gram-négatifs (ex. les espèces de Pseudomonas). Les documents de référence pour l'interprétation de la sensibilité sont mis à jour tous les ans. La version la plus récente doit être consultée afin d'interpréter correctement les résultats obtenus. Diverses méthodes ainsi que d'autres milieux et conditions ont été développés pour les espèces exigeantes, par exemple les espèces Haemophilus spp., Neisseria spp. et Streptococcus pneumoniae et les streptocoques.

La gélose Mitis Salivarius est utilisée avec la solution Tellurite 1% (416.215294.02) pour isoler Streptococcus mitis, S. salivarius (streptocoques non hémolytiques) et les entérocoques (streptocoques fécaux), en particulier à partir d'échantillons gravement contaminés.

S. mitis produit de petites ou minuscules colonies bleues. Ces colonies peuvent devenir plus faciles à distinguer avec une incubation plus longue.
S. salivarius produit des colonies bleues, lisses ou rugueuses, de 1 à 5 mm de diamètre selon le nombre de colonies sur la plaque.
Les espèces d'entérocoques forment des colonies bleu foncé ou noires, brillantes, légèrement surélevées, de 1 à 2 mm.

BD Gélose Difco™, technique

Utilisée dans la préparation de milieu de culture microbiologique. La gélose BD™ Difco™, technique est un agent solidifiant avec des paramètres de contrôle de qualité plus larges que d’autres géloses bactériologiques. Cependant, la solubilité, la température de gélification et la solidité sont soigneusement surveillées afin de permettre son utilisation.

La gélose Endo (Endo agar) est un milieu de culture différentiel légèrement sélectif pour la détection de coliformes et autres microorganismes entériques.

La sélectivité de la gélose Endo est due à la combinaison du sulfite de sodium et de la fuchsine basique, qui entraîne la suppression partielle des micro-organismes gram (+). Il est classé comme légèrement sélectif puisque d’autres milieux contiennent des inhibiteurs plus puissants pour les micro-organimes gram positifs.

Les coliformes fermentent le lactose, produisent des colonies rose foncé à rose-rouge présentant un aspect brillant et irisé vert métallisé avec coloration identique du milieu. Les colonies de micro-organismes qui ne fermentent pas le lactose sont incolores voir rose pâle et s’estompent sur le fond rose du milieu.

La gélose Sabouraud Dextrose est utilisée dans les procédures qualitatives pour la culture de champignons pathogènes et non pathogènes, en particulier les dermatophytes.

Le faible pH d'environ est favorable à la croissance des champignons, en particulier des dermatophytes, et légèrement inhibiteur des bactéries contaminantes dans les échantillons cliniques. La gélose dextrose Sabouraud est également recommandée pour les essais de produits cosmétiques et alimentaires.