Milieux de culture Déshydratés

Le CGA ou YGC est utilisé pour la recherche et dénombrement des Levures et moisissures dans les produits alimentaires.

Préparation :
Dissoudre 40 g/l
Autoclaver à 120 °C/15 min
Incuber à 20-25 °C/3 à 5 jours

Lorsque l'on soupçonne une présence importante de bactéries Gram-négatif, il est recommandé d'ajouter à 100 ml de milieu de culture, ramené à 47 °C, 10 ml d'une solution de Gentamicine à 1mg/ml

Composition :
Extrait de levure : 5,0
Glucose : 20,0
Chloramphénicol : 0,1
Agar agar : 14,9
pH final : 6,6 ± 0,2 à 25 °C

L'extrait de levure est un autolyse déshydraté de levures utilisées dans les milieux de culture à la place ou en tant qu'adjuvant de l'extrait de boeuf.

Agar de type E, adapté à la culture de cellules végétales

L'agar, un polysaccharide d'algue, a des propriétés gélifiantes. La structure de l'agar a été étudiée.

L'agar a été utilisé comme réactif pour les études suivantes :
- Études sur les cultures de cellules végétales.
- Comme complément de milieu pour la croissance d'Arabidopsis thaliana de type sauvage (écotype Columbia) et de graines transgéniques.
- Pour la solidification du milieu de culture des embryons somatiques de chêne-liège.

Bouillon de MacCONKEY.

Milieu de culture sélectif utilisé comme test présomptif pour les bactéries E. coli et coliformes et pour déterminer le titre en E. coli ou coliformes du lait, de l'eau et d'autres matières selon MacCONKEY et HILL (1901).

Gélose Mueller Hinton BIOKAR - 500G

La gélose de Mueller Hinton est reconnue par tous les experts comme étant le milieu de référence pour l’étude de la sensibilité des germes aux antibiotiques et aux sulfamides. Elle constitue un excellent milieu de base pour la fabrication de géloses au sang.

Composition : 
Pour 1L de milieu.

Hydrolysat acide de caséine : 17,5 g
Extrait de viande : 2,0 g
Amidon soluble : 1,5 g
Agar agar bactériologique : 17,0 g
pH final à 25°C : 7,3 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 38,0 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir en tubes ou en flacons.
4. Stériliser à l’autoclave à 115 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir le milieu à 44-47 °C.
6. Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide.
7. L’épaisseur de la gélose doit être impérativement de 4 mm.
8. Laisser solidifier sur une surface froide.
9. Faire sécher les boîtes à l’étuve, couvercle entrouvert de façon à éviter la formation de gouttelettes d’eau à la surface de la gélose, phénomène pouvant altérer les qualités de diffusabilité du milieu. 

Normes : NF U47-106, NF EN ISO 10272-1, XP CEN ISO/TS 10272-3, NF U47-107.

Le milieu nutritif WL est utilisé pour la culture des levures, des moisissures et des bactéries rencontrées dans les processus de brassage et de fermentation industrielle.

Le Rappaport bouillon selon Vassiliadis avec soja est utilisé pour l’enrichissement sélectif des Salmonelles.

Préparation :
Dissoudre 49,5 g/l . Autoclaver 15 min à 115 °C. Ensemencer 0,1 ml d’une culture de préenrichissement dans 10 ml de Rappaport. Incuber 24 h à 41,5 °C.

Composition :
Digestat enzymatique de soja : 4,5
Chlorure de sodium : 7,2
Chlorure de magnésium : 36,0
Phosphate dipotassique : 0,18
Dihydrogénophosphate de K : 1,26
Vert malachite oxalate : 0,036
pH final 5,2 ± 0,2

Agarose à faible électro-endosmose

BioReagent, pour la biologie moléculaire.
L'agarose d'usage courant est idéal pour l'analyse quotidienne des acides nucléiques par électrophorèse sur gel ou transfert (Northern ou Southern blot) et convient également aux applications protéiques telles que Ouchterlony et l'immunodiffusion radiale (RID).

Le SPS agar est utilisé pour l’isolement et la numération de Clostridium perfringens et Clostridium botulinum dans les denrées alimentaires.

Préparation :
Dissoudre 40 g/l . Autoclaver 15 minutes à 120 °C.
Incubation 24 à 48 h à 37 °C ou 46 °C en anaérobiose.

Composition :
Peptone de caséine : 15,0
Extrait de levure : 10,0
Citrate ferrique : 0,5
Sulfite de sodium : 0,5
Sulfate de polymyxine B : 0,01
Sulfadiazine sodique : 0,12
Agar agar : 13,9
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C

Le milieux Rappaport-Vassiliadis semi-solide modifié (MSRV) est utilisé avec de la novobiocine pour l’enrichissement sélectif des Salmonella mobiles dans les échantillons fécaux d’origine animale et les échantillons environnementaux.

Le milieux répond aux spécifications de formulations et de performance recommandées par l’ISO 6579 : amendement 1.

PREPARATION

Suspendre 31,6g de poudre dans 1 litre d’eau désionisée ou distillée. Chauffer en agitant régulièrement et faire bouillir pendant 1 minute jusqu’à ce que la poudre soit complètement dissoute.
NE PAS AUTOCLAVER.
Refroidir à 45-50°C.
Ajouter aseptiquement le contenu de 2 flacons de supplément de novobiocine (ref : 550.081021.02) chacun reconstitués avec 5 mL d’eau distillée stérile.
Bien mélanger.
Verser dans les boîtes de pétri.