Milieux de culture Déshydratés

La gélose glucosée de pomme de terre est utilisée pour l’isolement, la culture et le dénombrement des levures et moisissures notamment dans les produits alimentaires.
Cette gélose (Potato Dextrose Agar) peut être complétée avec de l'acide tartrique ou un antibiotique pour inhiber la croissance bactérienne. Elle peut être utilisée pour un comptage sur boîte pour un test de produit d'origine alimentaire, laitière, cosmétique. L'USP recommande la gélosée glucosée de pomme de terre pour un test d'énumération microbienne pour des produits pharmaceutiques non-stériles. Ce milieu peut être utilisé pour la croissance clinique des levures et moisissures. En outre, ce milieu peut être utilisé pour stimuler la sporulation (préparation de lames), maintenir le stock de culture de certains dermatophytes et différentier les variétés atypiques de dermatophytes par la production de pigment.

Complément : acide tartrique à 10%.

Préparation :
Dissoudre 39 g/l. Autoclaver 20 minutes à 115 °C.
Au moment de l’emploi ajouter 10 ml d’acide tartrique à 10% pour amener le pH à 3,5.

Composition :
Extrait de pomme de terre : 4,0
Glucose : 20,0
Agar agar : 15,0
pH final 5,6 ± 0,2

Bouillon lactosé bilié au vert brillant utilisé pour la détection ou la confirmation des bactéries des Coliformes dans
l'eau et les eaux usées, les aliments, les produits laitiers et autres matériaux d'importance sanitaire.

Incubation pour les Coliformes 24 et 48 h à 30 °C, pour les Coliformes fécaux et Escherichia coli 24 et 48 h à 44 °C

La gélose Hektoen enteric est un milieu modérément sélectif utilisé pour l'isolement et la culture de bactéries entériques à Gram négatif. Comme les micro-organismes, en particulier Shigella spp, provenant de matières fécales, de denrées alimentaires et d'autres matières d'importance sanitaire.

Ce milieu répond aux exigences de l'APHA et de l'ISO 21567 pour l'isolement et la différenciation de Salmonelle et Shigella spp.

Milieu OF Hugh Leifson BD 268820-500G

Milieu de base OF • Milieu OF avec glucides

Les milieux OF (Oxidation Fermentation) sont utilisés pour la détermination du métabolisme oxydatif et fermentatif des glucides des bactéries GRAM négatives.
La gélose permet de déterminer la mobilité.

Les apports du milieu OF Hugh Leifson :
- Les peptones apportent une forte concentration d'hydrate de carbone.
- Le dextrose apporte l'hydrate de carbone.

Composition du milieu pour 1 Litre :
Milieu basal Difco™ OF
Formule approximative* par litre

- Caséine de digestion pancréatique : 2,0 g
- Chlorure de sodium : 5,0 g
- Phosphate dipotassium : 0,3 g
- Bleu de Bromothymol : 0,08 g
- Agar : 2,0g

*Ajusté et/ou complété selon les besoins pour répondre aux critères de performance.

Utilisation prévue
Les milieux OF (Oxidation Fermentation) sont utilisés pour la détermination du métabolisme oxydatif et fermentatif des glucides par des bâtonnets gram-négatifs sur la base de la réaction acide dans le système ouvert ou fermé.

Résumé et explication

OF Medium a été développé par Hugh et Leifson qui ont décrit l'importance taxonomique du métabolisme fermentaire par rapport au métabolisme oxydatif des glucides par les bactéries gram-négatives.

Ils ont montré que lorsqu'un organisme est inoculé dans deux tubes de milieu de base OF contenant un hydrate de carbone et que le milieu dans l'un des tubes est recouvert de vaseline fondue avant l'incubation, les modèles de métabolisme ont une signification différente.
Les organismes oxydants ne produisent une réaction acide que dans le tube ouvert avec peu ou pas de croissance et aucune formation d'acide dans le tube recouvert.
Les organismes fermentaires produiront une réaction acide dans les deux types de tubes.
Les changements dans la gélose recouverte sont considérés comme dus à une véritable fermentation, tandis que les changements dans les tubes ouverts sont dus à l'utilisation oxydative des glucides présents.
Si le glucide n'est pas utilisé par l'une ou l'autre méthode, il n'y a pas de production d'acide dans l'un ou l'autre des tubes.

La gélose de base Slanetz Bartley est un milieu sélectif pour la détection et le dénombrement des entérocoques dans l'eau et d'autres matériaux, conformément à la norme ISO 7899-2.

Gélose viande foie glucosée, à 0,6% d’agar BIOKAR – 500G

La gélose viande-foie glucosée, à 0,6 % d’agar est un milieu spécialement étudié pour la culture et l’isolement des bactéries anaérobies en profondeur. Ce milieu permet également la recherche du mode respiratoire des microorganismes et convient pour le contrôle de stérilité des produits pharmaceutiques et des produits appertisés.

Composition : 
Pour 1L de milieu.

Peptone viande-foie : 30,0 g
Glucose : 2,0 g
Agar agar bactériologique : 6,0 g
pH final à 25°C : 7,3 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 38,0 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir :

• en tubes 9 x 180 mm pour la recherche du type respiratoire et l’isolement en profondeur.
• en tubes 20 x 200 mm pour les contrôles de stérilité.

4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir le milieu à 44-47 °C.

Le Chromagar vibrio est un milieu chromogène pour l'isolement et la différenciation des V. parahæmolyticus, V. vulnificus et V. choleræ.

Préparation :
Pour 5 litres de milieu, dissoudre 1 dose dans 5 litres d'eau déminéralisée ou distillée. Dans tous les cas la quantité de milieu Vibrio agar doit être de 74,7 g/l d'eau déminéralisée ou distillée. Porter à ébulltion à 100 °C jusqu'à fusion complète en donnant un mouvement de rotation lent et régulier. Laisser refroidir et maintenir en surfusion à 48 °C puis couler en boîtes de Pétri.

Ensemencement en surface, suivi d'une incubation à 37 °C/24 h.

Lecture :

• V.parahæmolyticus : Mauve
• V.vulnificus et V.choleræ : Bleu vert à bleu turquoise
• V.alginolyticus : Incolore

Le bouillon tryptone sel est un diluant pour le lait, les produits laitiers et les autres produits alimentaires.

Préparation :
Suspendre 9,5g dans 1 litre d'eau déminéralisée et autoclaver 15 minutes à 121 °C.

Composition :
Peptone de caséine (Tryptone) : 1,0
Chlorure de sodium : 8,5
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C