Milieux de culture

Solution Physiologique

L’Eau physiologique à 0,85 % est un diluant isotonique utilisé pour les dilutions ou la réalisation de suspensions bactériennes.

La solution physiologique (solution saline) est un diluant isotonique utilisé pour maintenir l'intégrité et la viabilité des cellules dans les procédures qui nécessitent la préparation d'une suspension d'organismes d'essai.

Cette solution est recommandée par le Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) et le Comité sur les tests de sensibilité aux antimicrobiens (EUCAST) pour préparer des suspensions bactériennes et ajuster la turbidité pour la préparation de l'inoculum. Il est également utilisé dans la préparation de solutions mères et de dilutions en série d'agents antimicrobiens.

FORMULE : Ingrédients en grammes pour un litre d'eau distillée ou déminéralisée. Chlorure de sodium 8,50

CONSERVATION : Le milieu en flacons ou tubes se conserve entre 2 et 25°C jusqu'à la date d’expiration indiquée sur l’emballage.

Le E. coli 0157 agar cHROMagar® utilise un mélange sélectif chromogène compatible avec la méthodologie classique de culture en surface (ensemencement par étalement sur gélose). (Adapté à la norme VF V08-032).

A partir d'un bouillon d'enrichissement T.S.B modifié dans lequel l'échantillon à tester a été incubé et après séparation et concentration à l'aide de billes immunomagnétiques, procéder à un ensemencement en surface par étalement sur les géloses E.coli 0157 agar CHROMagar®  et Agar Sorbitol Mac Conkey (SMAC agar). Ce milieu de culture innovant, conçu par A.Rambach, permet de repérer et de dénombrer :
- E.coli 0157 par simple numération de colonies colorées en mauve
- les colonies d'E.coli prennent une coloration bleue grâce à un marqueur spécifique

Avantages :
Simplicité : utilisant une technique de coloration compatible avec la croissance en surface sur la gélose, le E.coli 0157 agar CHROMagar® permet une lecture idéale à l'oeil nu et à la lumière ambiante du laboratoire par simple numération des colonies en mauve.
Fiabilité : grâce au mélange sélectif chromogène, on obtient une numération efficace et plus fiable des colonies.

Préparation :
Conditionnement pour 5 l : dissoudre 29 g/l d'eau déminéralisée. Porter à l'ébulition en agitant jusqu'à fusion complète. Laisser refroidir vers 47 °C ± 2 °C et maintenir le E.coli 0157 agar CHROMagar® en surfusion à cette température.

Composition :
Mélange sélectif chromogène : 1,0
Peptone et sel : 13,0
Agar agar : 15,0
pH final 6,8 ± 0,2 à 25 °C

La gélose de base Slanetz Bartley est un milieu sélectif pour la détection et le dénombrement des entérocoques dans l'eau et d'autres matériaux, conformément à la norme ISO 7899-2.

Gélose viande foie glucosée, à 0,6% d’agar BIOKAR – 500G

La gélose viande-foie glucosée, à 0,6 % d’agar est un milieu spécialement étudié pour la culture et l’isolement des bactéries anaérobies en profondeur. Ce milieu permet également la recherche du mode respiratoire des microorganismes et convient pour le contrôle de stérilité des produits pharmaceutiques et des produits appertisés.

Composition : 
Pour 1L de milieu.

Peptone viande-foie : 30,0 g
Glucose : 2,0 g
Agar agar bactériologique : 6,0 g
pH final à 25°C : 7,3 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 38,0 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir :

• en tubes 9 x 180 mm pour la recherche du type respiratoire et l’isolement en profondeur.
• en tubes 20 x 200 mm pour les contrôles de stérilité.

4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir le milieu à 44-47 °C.

COMPACT DRY EC (E.COLI /COLIFORMES) SACHET DE 4 BOITES

Le Compact Dry est un procédé simple et fiable permettant de détecter et de quantifier les microorganismes présents dans les produits agro-alimentaires, les cosmétiques ou autres matières premières, même de nature pharmaceutique.
Les compact dry chromogènique sont prêtes à l'emploi et conviennent aussi bien pour les contrôles des matières premières que des produits finis.

Caractéristiques: 

• Détection spécifique : par son milieu de culture et le substrat chromogène
• Répartition uniforme de l'échantillon sur le pad par capillarité 
• Diffusion automatique de l'échantillon.

Instructions pour le test

1. Ouvrir le couvercle et appliquer 1 ml de l’échantillon sur la plaque Compact Dry.
2. L’échantillon se répand automatiquement et uniformément sur la feuille et en l’espace de quelques secondes, il transforme la feuille sèche en un gel.
3. Refermer le couvercle de la plaque et inscrire les informations nécessaires dans la partie correspondante.
4. Retourner la plaque fermée et la placer dans l’incubateur.
5. Après le temps d’incubation, compter le nombre de colonies caractéristiques en vous servant du mode d’emploi. Les colonies peuvent être comptées plus simplement en plaçant du papier blanc sous la plaque.

Temps d’incubation 24 ± 2 heures Température d’incubation 35 ± 2 °C

Avantages : 

• Gain de temps de travail et d'interprétation des résultats
• L'interprétation des résultats plus facile grâce au substrat chromogénique qui permettra une identification des bactéries en fonction des couleurs.
• Conservation à température ambiante
• Longue durée de vie car milieu déhydraté

Le bouillon tryptone sel est un diluant pour le lait, les produits laitiers et les autres produits alimentaires.

Préparation :
Suspendre 9,5g dans 1 litre d'eau déminéralisée et autoclaver 15 minutes à 121 °C.

Composition :
Peptone de caséine (Tryptone) : 1,0
Chlorure de sodium : 8,5
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C

Les réactifs Colilert permettent une détection en 24 heures des coliformes et E.coli dans les échantillons d’eaux de 250 mL.

Avantages :

- rapidité d’utilisation : préparation d’une analyse présence/absence en moins d’une minute et d’une analyse quantitative en moins de deux minutes
- facilité d’utilisation : réactifs prêts à l’emploi et préparation ne nécessitant pas de compétences particulières en microbiologie
- précision : permet d’identifier spécifiquement E.coli
- économie : peu de matériels nécessaires et productivité plus importante

Le Plate count agar est utilisé pour la numération des Germes banaux dans le lait et les produits laitiers.

Préparation :
Dissoudre 22,5 g/l. Autoclaver 15 minutes à 120 °C.
Incubation :
- 72 h à 20 °C pour les psychrophiles
- 72 h à 30 °C pour les mésophiles
- 72 h à 55 °C pour les thermophiles

Composition :
Peptone de caséine (Tryptone) : 5,0
Extrait de levure : 2,5
Glucose : 1,0
Agar agar : 14,0
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C

Gélose KLIGLER FER

 KLIGLER fer agar est un milieu différentiel utilisé pour distinguer les entérobactéries sur la base de leur capacité à fermenter le glucose et le lactose et pour produire des sulfures.

La peptone protéinée et l'extrait de viande sont une source d'acides aminés et de peptides. L'extrait de levure fournit des acides aminés et des vitamines du groupe B. Le chlorure de sodium maintient l'équilibre osmotique du milieu. La combinaison de sulfate ferreux et de tiosulfate de sodium permet la détection de la production de sulfure d'hydrogène qui est mise en évidence par une couleur noire soit dans toute la crosse, soit dans une formation d'anneau à proximité le haut de la crosse. Le lactose et le glucose permettent la différenciation des espèces de bacilles entériques en raison du changement de couleur du pH du rouge phénol indicateur en réponse à l'acide produit lors de la fermentation de ces sucres

Tubes en verre prêts à l'emploi contenant 14 +/- 1 ml.

EAU PEPTONEE TAMPONNEE MERCK 7228-500G

L'Eau peptonée tamponnée est utilisée pour la préparation des suspensions mères de laits en poudre et concentrés, de yaourts, de produits laitiers, de produits d’origine animale et des autres produits alimentaires. Utilisée également pour le pré-enrichissement des Salmonelles.

Préparation :
Dissoudre 25,5 g/l. Autoclaver 15 minutes à 120 °C.
Incubation 18 heures à 37 °C.

Composition :
Peptone pancréatique de viande : 10,0
Chlorure de Sodium : 5,0
Phosphate disodique : 9,0
Phosphate monopotassique : 1,5
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C