Milieux de culture

Supplément sélectif chloramphénicol pour la détection et dénombrement des levures et moisissures.

Le supplément sélectif Chloramphénicol 50 mg, présenté sous forme lyophilisée, inhibe le développement de la plupart des contaminants bactériens, favorisant ainsi l’isolement et le dénombrement des levures et des moisissures.
Le supplément peut aussi être ajouté à la gélose Sabouraud (BK025) pour l’obtention de la gélose glucosée au chloramphénicol, existant en format déshydraté complet (BK007).

Préparation:

- Reprendre le lyophilisat en y ajoutant aseptiquement 3 mL d’eau distillée stérile, puis 2 mL d’acétone ou bien 5 mL d'une solution 1:1 éthanol / eau distillée stérile.
- Agiter le flacon plusieurs fois de façon à assurer une complète dissolution, tout en évitant la formation de mousse.
- Ajouter stérilement 1 mL de supplément sélectif à 110 mL de gélose glucosée à l'oxytétracycline OGA base (BK053) maintenue à 44-47°C ou à 100 mL de gélose de Sabouraud (BK025).
- Homogénéiser parfaitement.

Composition:

Chloramphénicol : 50,0 mg

Difco™ Bouillon nutritif de Wallerstein

Ce bouillon est utilisé pour cultiver les levures, les moisissures et les bactéries rencontrées dans les processus de brassage et de fermentation industrielle.

Composition (pour 1L de préparation):

Extrait de levure................................................................ 4.0 g
Digestat pancréatique de caséine.......................................... 5.0 g
Dextrose.................................................................... 50.0 g
Phosphate monopotassique.......................................... 0.55 g
Chlorure de potassium.................................................. 425.0 mg
Chlorure de calcium..................................................... 125.0 mg
Sulfate de magnésium.................................................. 125.0 mg
Chlorure de fer.............................................................. 2.5 mg
Sulfate de manganèse...................................................... 2.5 mg
Vert de bromocresol....................................................... 22.0 mg

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Le bouillon Acétamide est un milieu déshydraté utilisé pour la confirmation de Pseudomonas aeruginosa dans de l'eau embouteillée. 

Composition en gramme par L

• Acétamide : 2,0 g
• Sulfate de magnésium anhydre (MgSO4) : 0,2 g
• Phosphate monopotassique :1,0 g
• Molybdate de sodium (Na2MoO4, 2.H2O) : 5,0 mg
• Sulfate de fer (FeSO4, 7.H2O) : 0,5 mg
• Chlorure de sodium : 0,2 g
• Eau (exempte d’ammoniac) : 1000 mL 

Norme :  NF EN ISO 16266 et NF T90-421. 

La solution TTC 1% Difco™ (Triphenyltetrazolium Chloride) est prête à l’emploi pour la préparation de milieu de culture.

La solution TTC 1% est préparée à partir de 2,3,5 triphenyltetrazolium chloride destinée à la microbiologie. Elle est utilisée comme un indicateur redox dans les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Chapman a expliqué que l’ajout de TTC à la gélose Tergitol™ permettait la détection et la confirmation de E. coli après seulement 10 heures d’incubation. Chapman a aussi expliqué que la gélose Tergitol 7 avec ajout de TTC donnait un milieu sélectif pour la détection et l’isolement de Candida albicans. Chapman ajoutait du TTC, Tergitol 7 et du pourpre de bromocrésol à la gélose Sabouraud au Malt pour l’isolement et l’identification de C. calbicans et autre champignon. Pagao, Levin et Trejo incorporaient du TTC dans la base Pagano Levin pour la détection et l’isolement des espèces de Candida.

Slanetz et Bartley utilisaient le TTC dans la gélose m-Enterococcus pour l’énumération des entérocoques. Sur ce milieu les colonies apparaissent de couleur rose à marron foncé. Kenner, Clark et Kabler utilisaient le TTC avec la gélose KF Streptococcus et le bouillon pour détecter et énumérer les streptocoques à la surface de l’eau.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

La solution TTC 1% est utilisée comme un indicateur redox pour les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Elle est incolore dans sa forme oxydée et est réduite en triphénylformazan par des systèmes réducteurs. La formation du formazan est une réaction irréversible. Une fois que le microorganisme réduit l’indicateur, la couleur rouge persiste.

Emulsion stérile de jaune d’œuf à la Polymyxine B pour gélose sélective pour le dénombrement de Bacillus cereus selon Mossel.

Préparation:

- Dans chaque flacon de 90 mL de milieu de base, ajouter stérilement 10 mL d’émulsion stérile de jaune d’œuf avec Polymyxine B (BS055).
- Homogénéiser parfaitement.
- Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide.

Composition:

- Polymyxine B (sulfate) : 5x10^4 UI
- Emulsion stérile de jaune d’œuf : 50,0 mL

Pour l'isolement et la détection de Pseudomonas spp.

P.aeruginosa est un indicateur valable pour le contrôle de l'efficacité des traitements de désinfection de l'eau. Ce paramètre est actuellement utilisé comme critère dans la régulation des pataugeoires et piscines. En plus de son rôle d'indicateur de propreté, P aeruginosa est également recherché comme pathogène opportuniste dont la transmission est souvent associée à l'eau.
CHROMagar™ Pseudomonas fournit des résultats rapides et clairs pour la détection de Pseudomonas grâce à des couleurs de colonies différentielles. 

Lecture :

• Pseudomonas dont P.aeruginosa
  • Bleu-vert
• Autres microorganismes tels que S.saprophyticus, E.coli, P.mirabilis
  • Sans couleur ou inhibé

Gélose DG 18 (Dichloran glycérol chloramphenicol) (base)

• Normes: ISO 21527 et FDA-BAM GranuCult®
• Valeur de pH: 5.4 - 5.8 (H₂O, 25 °C)

Le milieu SIM est utilisé pour différencier les bacilles entériques sur la base de la production de sulfure, de la formation d'indole et de la motilité.

Gélose OXFORD

DESCRIPTION:

La gélose Oxford est un milieu sélectif utilisé pour l’isolement et la détection de Listeria monocytogenes et des autres Listeria dans les produits alimentaires, même fortement contaminés.
Le milieu peut être utilisé comme second milieu au choix dans le cadre de la méthode de recherche de Listeria monocytogenes en microbiologie des aliments (NF EN ISO 11290-1).

CONDITIONNEMENT

Milieu déshydraté :
BK110HA - Flacon de 500 g

Supplément pour gélose Oxford (CCCFA) :
BS00308 - 10 flacons qsp 500 mL

Pour la détection et l'isolement des Salmonella y compris la Salmonella lactose positive dans les échantillons alimentaires. 

99% de sensibilité.
Les différentes révisions de la norme ISO 6579 pour le test Salmonella sont le résultat direct de l'incidence croissante des Salmonella lactose positives dans des cas d'intoxication alimentaire. 
CHROMagar™ Salmonella Plus a été développé pour répondre aux exigences de la norme 6579 et offre une identification claire et facile des Salmonella, notamment :Salmonella lactose positives, S.Typhi et Paratyphi. CHROMagar™ Salmonella Plus s'utilise après les étapes de pré-enrichissement et d'enrichissement avec RambaQuick Salmonella (réf 572.001000.60). 

Lecture :

• Salmonella
  • Mauve
• E.coli
  • Incolore
• Coliformes
  • Bleu

Avantages :

• le Salmonella Plus agar, permettant l'isolement des Salmonella, S.Typhi, S.Paratyphi et des Salmonella lactose+, répond à la Norme ISO 6579
• les manipulations sont rapides et bien connues du technicien de laboratoire. Les colorations sont franches et faciles à lire.

Préparation :

Vider une dose complète pré-pesée dans 5 litres d'eau déminéralisée ou peser la quantité de poudre nécessaire dans la proportion de 32,8 g/litre d'eau. Ajouter le liquide du flacon de supplément dans la proportion de 6 g/litre. Chauffer, agiter fréquemment, puis porter à ébullition jusqu'à dissolution complète. Refroidir dans un bain-Marie à 45/50 °C. Couler en boîtes de Pétri.

Inoculation : ensemencer en surface et incuber 18/24 h à 37 °C.