Milieux de culture

Supplément sélectif chloramphénicol pour la détection et dénombrement des levures et moisissures.

Le supplément sélectif Chloramphénicol 50 mg, présenté sous forme lyophilisée, inhibe le développement de la plupart des contaminants bactériens, favorisant ainsi l’isolement et le dénombrement des levures et des moisissures.
Le supplément peut aussi être ajouté à la gélose Sabouraud (BK025) pour l’obtention de la gélose glucosée au chloramphénicol, existant en format déshydraté complet (BK007).

Préparation:

- Reprendre le lyophilisat en y ajoutant aseptiquement 3 mL d’eau distillée stérile, puis 2 mL d’acétone ou bien 5 mL d'une solution 1:1 éthanol / eau distillée stérile.
- Agiter le flacon plusieurs fois de façon à assurer une complète dissolution, tout en évitant la formation de mousse.
- Ajouter stérilement 1 mL de supplément sélectif à 110 mL de gélose glucosée à l'oxytétracycline OGA base (BK053) maintenue à 44-47°C ou à 100 mL de gélose de Sabouraud (BK025).
- Homogénéiser parfaitement.

Composition:

Chloramphénicol : 50,0 mg

Difco™ Bouillon nutritif de Wallerstein

Ce bouillon est utilisé pour cultiver les levures, les moisissures et les bactéries rencontrées dans les processus de brassage et de fermentation industrielle.

Composition (pour 1L de préparation):

Extrait de levure................................................................ 4.0 g
Digestat pancréatique de caséine.......................................... 5.0 g
Dextrose.................................................................... 50.0 g
Phosphate monopotassique.......................................... 0.55 g
Chlorure de potassium.................................................. 425.0 mg
Chlorure de calcium..................................................... 125.0 mg
Sulfate de magnésium.................................................. 125.0 mg
Chlorure de fer.............................................................. 2.5 mg
Sulfate de manganèse...................................................... 2.5 mg
Vert de bromocresol....................................................... 22.0 mg

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UREE 40 % SUPPLEMENT LF 80292 - 10 X 5 ML

C'est un supplément liquide d'urée nécessaire pour la fabrication du milieu Urée 40%+Agar (réf 550.610107.54)

Le milieu complet est utilisé dans le test de recherche de l'uréase recommandé par l'ISO 6785 et l'IDF 93 pour l'identification des Salmonella ssp dans les produits laitiers.

COMPOSITION:

5mL Urée/ flacon

Le bouillon Acétamide est un milieu déshydraté utilisé pour la confirmation de Pseudomonas aeruginosa dans de l'eau embouteillée. 

Composition en gramme par L

• Acétamide : 2,0 g
• Sulfate de magnésium anhydre (MgSO4) : 0,2 g
• Phosphate monopotassique :1,0 g
• Molybdate de sodium (Na2MoO4, 2.H2O) : 5,0 mg
• Sulfate de fer (FeSO4, 7.H2O) : 0,5 mg
• Chlorure de sodium : 0,2 g
• Eau (exempte d’ammoniac) : 1000 mL 

Norme :  NF EN ISO 16266 et NF T90-421. 

GELOSE BAIRD-PARKER

La gélose Baird-Parker est recommandée pour la recherche et la numération des staphylocoques coagulase positive. Son utilisation est recommandée par la pharmacopée européenne et américaine et pour la recherche de Staphylococcus aureus dans les aliments.

La solution TTC 1% Difco™ (Triphenyltetrazolium Chloride) est prête à l’emploi pour la préparation de milieu de culture.

La solution TTC 1% est préparée à partir de 2,3,5 triphenyltetrazolium chloride destinée à la microbiologie. Elle est utilisée comme un indicateur redox dans les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Chapman a expliqué que l’ajout de TTC à la gélose Tergitol™ permettait la détection et la confirmation de E. coli après seulement 10 heures d’incubation. Chapman a aussi expliqué que la gélose Tergitol 7 avec ajout de TTC donnait un milieu sélectif pour la détection et l’isolement de Candida albicans. Chapman ajoutait du TTC, Tergitol 7 et du pourpre de bromocrésol à la gélose Sabouraud au Malt pour l’isolement et l’identification de C. calbicans et autre champignon. Pagao, Levin et Trejo incorporaient du TTC dans la base Pagano Levin pour la détection et l’isolement des espèces de Candida.

Slanetz et Bartley utilisaient le TTC dans la gélose m-Enterococcus pour l’énumération des entérocoques. Sur ce milieu les colonies apparaissent de couleur rose à marron foncé. Kenner, Clark et Kabler utilisaient le TTC avec la gélose KF Streptococcus et le bouillon pour détecter et énumérer les streptocoques à la surface de l’eau.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

La solution TTC 1% est utilisée comme un indicateur redox pour les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Elle est incolore dans sa forme oxydée et est réduite en triphénylformazan par des systèmes réducteurs. La formation du formazan est une réaction irréversible. Une fois que le microorganisme réduit l’indicateur, la couleur rouge persiste.

MRS Agar pH 5

MRS Agar pH 5 est un milieu utilisé pour la culture de bactéries lactiques (LAB), y compris les genres Lactobacillus, Leuconostoc et
Pediococcus, provenant de presque tous les types d'aliments.

Plate count agar est utilisé pour la numération des Germes banaux dans le lait et les produits laitiers.

Prêt à l'emploi. Conservation de 15 à 20 °C à l'obscurité.

INCUBATION :

Emulsion stérile de jaune d’œuf à la Polymyxine B pour gélose sélective pour le dénombrement de Bacillus cereus selon Mossel.

Préparation:

- Dans chaque flacon de 90 mL de milieu de base, ajouter stérilement 10 mL d’émulsion stérile de jaune d’œuf avec Polymyxine B (BS055).
- Homogénéiser parfaitement.
- Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide.

Composition:

- Polymyxine B (sulfate) : 5x10^4 UI
- Emulsion stérile de jaune d’œuf : 50,0 mL

Pour la détection des bactéries résistantes aux carbapénèmes. 

Une défaillance à détecter rapidement des bactéries Gram (-) résistantes aux antibiotiques contribue à leur propagation incontrôlée, et parfois à des échecs thérapeutiques. Pour répondre à cette problématique, CHROMagar™ a développé un ensemble de suppléments sélectifs à ajouter à CHROMagar™ Orientation, spécialement conçus pour le dépistage des bactéries Gram (-) qui expriment différents types de résistances aux antibiotiques.