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Un milieu de culture est une préparation utilisé en microbiologie, avec divers composants qui reproduisent un environnement propice au développement de micro-organismes (levures, bactéries, moisissures, cellules). Il existe une grande variété de milieux de culture qui sont utilisés pour produire, conserver, isoler ou identifier certains micro-organismes.

 

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  1. AGAR CHROMOSELECT POUR ENTEROCOQUES SIGMA 51759 -100G

    Réf.: 231134  243.051759.40

    Gélose rapide Enterococci ChromoSelect

    Pour la microbiologie, NutriSelect™ Plus.

    La gélose Rapid Enterococci ChromoSelect est utilisée pour une identification et une différenciation rapides et faciles des entérocoques dans les échantillons d'eau. Elle contient un substrat chromogène, qui facilite la détection des entérocoques dans les échantillons d'eau.
    Milieu pour le dosage des entérocoques dans l'eau.

    Préparation :
    Suspendre 33,6 g dans 1 litre d'eau distillée et chauffer jusqu'à ébullition pour dissoudre complètement le milieu. Stériliser à l'autoclave à 121°C pendant 15 minutes puis refroidir à 50°C et verser dans des boîtes de Pétri stériles.

    52,70 € HT
  2. COLUMBIA SANG MOUTON 5% GELOSE LF 11025-20 BTES 90MM

    Réf.: 245314  550.011025.02

    La gélose Columbia au sang de mouton (5%) est un milieu de croissance enrichi non-sélectif pour la culture de germes exigeants, la présence de sang permet l’expression de l’hémolyse qui est un critère de base de l’orientation de l’identification bactérienne.

    Examiner les boîtes de pétri pour vérifier la croissance et les réactions hémolytiques. Quatre types d'hémolyse peuvent être décrits :
    1. α-hémolyse provoque une décoloration verdâtre du milieu autour de la colonie
    2. β-hemolysis produit une zone claire entourant la colonie
    3. γ-hemolysis n'implique aucun changement de la couleur du milieu
    4. ά-hemolysis produit une petite zone claire entourant la colonie et une décoloration partielle au-delà

    Le milieu se présente ici en boîte de pétri pré-coulée (22 ± 1 ml) de 90 mm.

    Composition :

    Digestion pancréatique de la caséine........ 12,0 g/l
    Amidon.................................................... 1,0 g/l
    Digestion peptique des tissus animaux....... 5,0 g/l
    Chlorure de sodium................................... 5,0 g/l
    Extrait de levure........................................ 3,0 g/l
    Extrait de bœuf......................................... 3,0 g/l
    Sang de mouton défibriné......................... 50,0 ml
    Agar....................................................... 14,0 g/l

    66,25 € HT
  3. BOUILLON WORT POUR LA MICROBIO LOGIE FLUKA 53493 - 500G

    Réf.: 231184  243.053493.54

    BOUILLON WORT POUR LA MICROBIOLOGIE 53493 - 500G

    Bouillon wort permet la détection et le dénombrement des champignons, en particulier des levures, dans le beurre, les sirops et autres matières, notamment dans l'industrie des boissons gazeuses.

    Composition :

    chlorure d'ammonium, 1.0 g/L
    peptone de caséine, 1.0 g/L
    dextrine, 2,5 g/L
    phosphate dipotassique, 1,0 g/L
    extrait de malt, 15,0 g/L
    maltose, 12,5 g/L

    176,80 € HT
  4. RAPPAPORT-VASSILIADIS R10 BOUILLON - BD 218581 - 500 G

    Réf.: 240113  416.800000.58

    Bouillon Rappaport-Vassiliadis R10 Difco ™ 

    Le bouillon Rappaport-Vassiliadis R10 est utilisé pour enrichir sélectivement  les Salmonelles dans la viande et de produits laitiers, matières fécales dans les eaux usées ou polluées.

    133,60 € HT
  5. NUTRITIVE GELOSE MERCK 5450-500G

    Réf.: 212366  145.005450.54

    La gélose nutritive est utilisée pour la culture de bactéries non fastidieuses. Ce milieu de culture est conforme aux spécifications données par les normes EN ISO 6579, EN ISO/FDIS 6579-1, EN ISO 6785 I IDF 93, EN ISO 10273, EN ISO 19250, EN ISO 21528 et APHA. 

    399,00 € HT
  6. SUPPLEMENT SELECTIF PALCAM LISTERIA MERCK 12122 - X10

    Réf.: 213107  145.012122.10

    Chaque dose permet de supplémenter 500 ml d’agar ou bouillon Palcam Merck.

    A 500 ml d’agar ou bouillon Palcam Merck ajouter une dose de supplément reconstitué avec 1 ml d’eau distillée stérile.

    Composition :
    Sulfate de Polymyxine B : 0,005
    Ceftazidime : 0,010
    Acriflavine : 0,0025

    172,00 € HT
  7. LB MILLER GELOSE BD 244520-500G

    Réf.: 239948  416.244520.54

    LB Miller Gelose BD 244520-500G

    La gélose LB, Miller est utilisée pour le maintien et le développement d'Escherichia coli en procédures de microbiologie moléculaire.

    Ce milieu LB Miller est  riche en nutriments et est adapté pour la croissance des souches recombinantes. E. coli se développe plus rapidement car ils fournissent aux bactéries des acides aminés, des précurseurs de nucléotides, vitamines et autres métabolites que le micro-organisme devrait autrement synthétiser.

    Les Apports du milieu LB Miller :
    - Les peptones fournissent l'azote et le carbone.
    - L'extrait de levure apporte la source de vitamine et d'oligo-élements
    - Le chlorure de sodium apporte ions Na et ainsi l'équilibre osmotique
    - L'agar est l'agent solidifiant

    Composition du milieu LB Miller pour 1 litre:
    - Tryptone : 10g
    - Extrait de levure : 5g
    - Chlorure de soduim : 10g
    - Agar : 15g

     

    134,80 € HT
  8. TRYPTICASE SOJA GELOSE BK 028-500G

    Réf.: 235528  250.033927.54

    Gélose Tryptone Soja BIOKAR - 500G

    La gélose Tryptone soja est utilisée comme milieu de base destiné à être additionné de sang. Elle est préparée avec des matières premières sélectionnées qui ne la brunissent pas. Elle est spécialement conçue pour mettre en évidence les réactions hémolytiques et pour favoriser la croissance des germes particulièrement exigeants aérobies et anaérobies
    Elle permet de réaliser le test d’hémolyse sur les colonies présumées de Bacillus cereus, selon la norme ISO 21871.

    Composition : 
    Pour 1L de milieu.

    Tryptone : 15,0 g
    Peptone papaïnique de soja : 5,0 g
    Chlorure de sodium : 5,0 g
    Agar agar bactériologique : 15,0 g
    pH final à 25°C : 7,3 ± 0,2

    Préparation :

    1. Mettre en suspension 40,0 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
    2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
    3. Répartir en flacons de 100 mL.
    4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
    5. Refroidir et maintenir à 44-47 °C.
    6. Ajouter stérilement 5 à 7 mL de sang défibriné stérile de mouton par flacon.
    7. Homogénéiser parfaitement.
    8. Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide.
    9. Faire sécher les boîtes à l’étuve, couvercle entrouvert

    Norme : NF EN ISO 21871. 

    75,80 € HT
  9. BOUILLON DIFFERENTIEL RENFORCE CLOSTRIDIUM - 11699 - 500G

    Réf.: 213088  145.011699.54

    Bouillon différentiel renforcé des Clostridium MERCK 11699 - 500 G

    Le bouillon différentiel renforcé des Clostridium permet d'isoler et de dénombrer les Clostridium.

    Propriétés :
    - L'indicateur de l'oxydo-réduction de la résazurine : pour la surveillance de l'anaérobiose
    - Les Clostridium réduisent les sulfites en sulfure de fer pour donner des colonies noires

    331,00 € HT
  10. EAU PEPTONEE TAMPONNEE 20G/L BK 131-500G

    Réf.: 235540  250.033977.54

    Eau peptonée tamponnée BIOKAR - 500G

    L’eau peptonée tamponnée est un diluant à usage général préconisé dans de nombreuses normes pour la préparation des échantillons, des suspensions mères et des dilutions décimales.
    Ce milieu est également utilisé pour le pré-enrichissement des salmonelles et de Cronobacter sakazakii, en permettant notamment de revivifier les microorganismes ayant subi des traitements sublétaux tels que atomisation, pasteurisation, ajout de conservateurs, pressions osmotiques élevées, fortes acidités. 
    Il est aussi utilisé comme milieu de suspension et de revivification pour le dénombrement de Listeria monocytogenes.

    Composition : 
    Pour 1L de milieu.

    Peptone : 10,00 g
    Chlorure de sodium : 5,00 g
    Phosphate disodique anhydre : 3,57 g
    Phosphate monopotassique anhydre : 1,50 g
    pH des milieux prêts-à-l ’emploi à 25 °C : 7,0 ± 0,2.

    Préparation :

    1. Mettre en solution 25,5 g de milieu déshydraté BK018 de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
    2. Agiter lentement, jusqu’à dissolution complète.
    3. Répartir en tubes ou en flacons.
    4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
    5. Refroidir à température ambiante. 

    NOTE : Pour une eau peptonée tamponnée double concentration mettre en suspension 51,0 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.

    Normes : NF U 47-100, NF U 47-101, NF U 47-102, NF EN ISO 6887-5, NF V 08-407, NF EN ISO 19250, NF EN ISO 11133, NF EN ISO 6579-1, NF EN ISO 22964, NF EN ISO 6887-1, NF EN ISO 6887-2, NF EN ISO 6887-3, NF EN ISO 6887-4, NF EN ISO 11290-2, NF EN ISO 21528-1.

    71,30 € HT

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On retrouve 4 principaux types de milieux :

  • Les milieux standards qui permettent la croissance des micro-organismes sans besoin particulier, tel que PCA (Plate Count Agar), TSA (Tryptic Soy Agar) ou bouillon nutritif.
     
  • Les milieux enrichis sont caractérisés par l’ajout d’un composé particulier permettant la croissance de micro-organismes exigeant ce composé qui peut être du sang, du sérum, du jaune d’œuf, du lait …
     
  • Les milieux sélectifs permettent la croissance d’une espèce de micro-organismes et donc son isolement, tandis que les autres espèces sont inhibées. Un milieu de culture est rendu sélectif pour une espèce microbienne lorsque sont seules satisfaites les exigences nutritives et les conditions de développement particulières à cette espèce. Les principaux facteurs de sélection microbienne utilisés seuls ou en association sont : la température d'incubation, le pH du milieu, la faculté d'utiliser une source nutritive déterminée (azote, carbone, …) et la résistance à l'action bactéricide d'un antiseptique ou d'un antibiotique.
     
  • Les milieux de culture chromogènes permettent l’identification précise de micro-organismes par coloration des colonies. Le principe de ce milieu, repose sur la présence d'un ou plusieurs substrats chromogènes permettant la coloration des colonies à la suite de sa dégradation par des enzymes bactériennes spécifiques et de la libération du chromophore.

Les milieux de culture sont disponibles soit sous forme déshydratée en poudre ou prêt à l’emploi en bouillon ou gélose. Les milieux sont solidifiés grâce à la présence d’agar pour l’obtention d’une gélose, tandis que les bouillons n’en contiennent pas.

Milieux de culture déshydratés

Le format déshydraté assure une composition constante du milieu et un stockage simplifié, car il n’est pas nécessaire de le conserver réfrigéré.
Pour l’utilisation, il est nécessaire de le reconstituer en mélangeant la poudre avec un volume d’eau préconisé, l’homogénéiser, le dissoudre par chauffage et le répartir dans des flacons ou des tubes en verre en vue d’être stérilisé par autoclavage. Une fois refroidi, le milieu de culture peut être additionné d’un supplément qui ne supporte pas l’autoclavage, et ensuite il peut être distribué dans des tubes ou des boîtes de pétri.

Milieux de culture prêts à l’emploi

L’avantage du format prêt à l’emploi c’est qu’il n’y a pas de préparation préalable à réaliser, hormis la remise en surfusion pour liquéfier le milieu et le distribuer dans des tubes ou des boîtes de pétri. Par contre ce type de milieux possède une durée de conservation beaucoup plus courte que les milieux déshydratés et le stockage est plus complexe.

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