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Un milieu de culture est une préparation utilisé en microbiologie, avec divers composants qui reproduisent un environnement propice au développement de micro-organismes (levures, bactéries, moisissures, cellules). Il existe une grande variété de milieux de culture qui sont utilisés pour produire, conserver, isoler ou identifier certains micro-organismes.

 

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  1. AGAR DE TRIBUTYRINE POUR LA MICROBIOLOGIE FLUKA 91015-100G

    Réf.: 232242  243.091015.40

    AGAR DE TRIBUTYRINE POUR LA MICROBIOLOGIE 91015-100G

    Agar de tributyrine permet la détection et le dénombrement des micro-organismes lipolytiques dans les aliments et autres matières (staphylocoques, pseudomonades, clostridiae et flavobactéries marines).

    Composition :

    agar, 12 g/L
    extrait de levure, 3 g/L

    73,30 € HT
  2. RCA CLOSTRIDIES GELOSE MERCK 5410-500G

    Réf.: 212354  145.005410.54

    Gélose Clostridies (RCA) - Merck 500G

    La gélose RCA (Reinforced Clostridial Agar) est utilisé pour la culture et le dénombrement des clostridies, autres anaérobies et microorganismes dans les denrées alimentaires. 

    Ce milieu de culture est exempt d'inhibiteurs et contient de la cystéine comme réducteur.
    Selon HIRSCH et GRINSTED, la Polymyxine B peut être ajoutée pour inhiber les bactéries Gram négatives.

    Préparation :

    1. Mettre en suspension 50 g/L.
    2. Distribuer dans des tubes à essai.
    3. Autoclaver 15 min à 121 ° C.
    4. Refroidir à 45-50 ° C
    5. Ajouter 0,02 g de Polymyxine B / L.

    Composition : 

    Extrait de viande : 10,0 g/L
    Peptone de la caséine :10,0 g/L
    Extrait de levure : 3,0 g/L
    D (+) glucose : 5,0 g/L
    Amidon  : 1,0 g/L
    Chlorure de sodium : 5,0 g/L
    Acétate de sodium : 3,0 g/L
    Chlorure de L-cystéinium : 0,5 g/L
    Agar-agar : 12,5 g/L

    pH : 6.8 ± 0.2 à 25 °C. 

    351,00 € HT
  3. SUPPLEMENT SELECTIF SALMOSYST - 10141 - PACK X250

    Réf.: 212975  145.010141.02

    Solution Salmosyst :
    - un enrichissement à l'aide du Salmosyst supplément sélectif en comprimés à 37 °C/18 à 22 h

    Avantages :
    - gain de temps : la solution Salmosyst permet de réduire le temps global (pré-enrichissement + enrichissement) à 24-30 heures
    - simplicité d'emploi : après pré-enrichissement de 25 g d’échantillon dans 225 ml de Salmosyst bouillon de base, (37 °C/6 à 8 h) et ajouter 1 comprimé de Salmosyst supplément sélectif à 10 ml de bouillon de pré-enrichissement (37 °C/18 à 22 h)

    Suggestion Humeau :
    Association Samosyst-milieu de Rambach agar : pré-enrichissement Salmosyst+enrichissement Salmosyst=18 à 24 h. Durée totale de la recherche de 50 heures.

    Composition :
    Tetrathionate de potassium : 0,2
    Bile de boeuf : 0,08
    Vert brillant : 0,0007
    Carbonate de calcium : 0,1
    pH final 7,1 ± 0,2

    224,00 € HT
  4. POTATO DEXTROSE AGAR SIGMA P2182 - 250G

    Réf.: 226700  243.002182.47

    Potato Dextrose Agar for microbiology, NutriSelect™ Basic.


    La gélose au dextrose de pomme de terre est un milieu sélectif, pour Sclerotinia sclerotiorum. Il est connu pour empêcher la croissance d'autres champignons. Il est utilisé pour étudier la dispersion des ascospores.
    La gélose au dextrose de pomme de terre a été utilisée pour la sous-culture de S. sclerotiorum. Il a également été utilisé pour cultiver des colonies fongiques dérivées de spores uniques.

    74,50 € HT
  5. GELOSE KING B BM10508 - 7X7ML

    Réf.: 254533  770.010508.02

    GELOSE KING B

    CONFIRMATION DE PSEUDOMONAS AERUGINOSA

    La gélose King B permet la production de fluorescéine (ou pyoverdine), un pigment jaune-vert fluorescent sous lumière ultraviolette, par certaines bactéries Pseudomonas. Ce milieu est principalement utilisé pour l'analyse de l'eau pour la détection et l'identification des espèces de Pseudomonas aeruginosa qui produisent ce fluorochrome, contrairement aux espèces de Pseudomonas aeruginosa qui ne le font pas.Utilisé pour la détection et l'identification de Pseudomonas aeruginosa.

     

    Le phosphate dipotassique augmente le niveau de phosphore fourni par la peptone, stimulant ainsi la production de fluorescéine tout en inhibant simultanément la production de pyocyanine.
    Le sulfate de magnésium fournit les cations nécessaires à la formation de la pyoverdine.

    Les colonies présentant une fluorescence jaune-vert sous lumière UV 360 nm sont considérées comme positives selon la méthode de test de l'eau décrite dans la norme NF EN ISO 16266.

    27,30 € HT
  6. ORANGE EXTRAIT GELOSE BK 103-500G

    Réf.: 235524  250.033894.54

    Gélose à l'extrait d'orange BIOKAR - 500G

    La gélose à l’extrait d’orange est utilisée pour la culture, l’isolement et la numération des levures, des moisissures et des bactéries acidotolérantes (Bacillus, lactobacilles, Leuconostoc, Streptococcus, Clostridium) responsables d’altérations dans les jus de fruits et les concentrés d’agrumes.

    Elle est également employée pour le contrôle sanitaire des équipements industriels qui servent à la préparation des boissons à base de fruits.

    Composition : 
    Pour 1L de milieu.

    Tryptone : 10,0 g
    Extrait autolytique de levure : 3,0 g
    Extrait d’orange : 5,0 g
    Glucose : 4,0 g
    Phosphate dipotassique : 3,0 g
    Agar agar bactériologique : 17,0 g 
    pH final à 25°C : 5,5 ± 0,2

    Préparation :

    1. Mettre en suspension 42,0 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
    2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
    3. Répartir en tubes ou en flacons.
    4. Stériliser à l’autoclave à 115 °C pendant 15 minutes.
    5. Refroidir et maintenir le milieu à 44-47 °C.
    145,20 € HT
  7. TRYPSIN (1X) STERILE SAFC 59429C - 100ML

    Réf.: 231303  243.059429.40

    TRYPSIN (1X) STERILE SAFC 59429C - 100ML

    Les solutions de trypsine-EDTA sont utilisées pour libérer les cellules adhérentes des surfaces de culture. Elles sont généralement composées de concentrations variables de trypsine naturelle dérivée du pancréas porcin et d'EDTA.

    Composition :

    phenol red: 10.620 mg/L
    NaHCO3: 350.000 mg/L

    77,50 € HT
  8. BACILLUS CEREUS GELOSE BASE MOSSEL BK 116HA-500G

    Réf.: 235537  250.033969.54

    Gélose de base Bacillus Cereus selon Mossel BIOKAR - 500G

    La gélose sélective pour Bacillus cereus selon Mossel est utilisée pour la détection et le dénombrement des spores et formes végétatives de Bacillus cereus dans les produits alimentaires.

    Composition : 
    Pour 1L de milieu.

    Tryptone : 10,0 g
    Extrait de viande : 1,0 g
    D-mannitol : 10,0 g
    Chlorure de sodium : 10,0 g
    Rouge de phénol : 25,0 mg
    Agar agar bactériologique : 13,5 g
    pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25 °C : 7,2 ± 0,2

    Préparation :

    1. Mettre en suspension 44,5 g de milieu déshydraté dans 0,9 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
    2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
    3. Répartir en flacons à raison de 90 mL.
    4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
    5. Refroidir et maintenir à 44-47 °C.
       
    6. Dans chaque flacon de 90 mL de milieu de base, ajouter stérilement 10 mL d’émulsion stérile de jaune d’œuf avec Polymyxine B (770.005508.54).
    7. Homogénéiser parfaitement.
    8. Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide. 

    NOTE : A la place de 10 mL d’émulsion stérile de jaune d’œuf à la polymyxine, il est possible d’ajouter 10 mL d’émulsion de jaune d’œuf (770.006608.02) et 1 mL de supplément polymyxine (supplément 770.000708.02 réhydraté avec 5 mL d’eau stérile).

    Normes : NF EN ISO 7932, NF EN ISO 21871, NF EN ISO 11133.

    126,30 € HT
  9. TBX GELOSE BK BM17108 - 10X200ML

    Réf.: 254560  770.017108.02

    TBX GELOSE BK BM17108 - 10X200ML

    La gélose TBX est un milieu sélectif pour le dénombrement des Escherichia coli Β-D-glucuronidase positive dans les produits alimentaires.

    Composition pour 1 Litre de milieu : 
    - Tryptone : 20,0 g
    - Sels biliaires n°3 : 1,5 g
    - BCIG (5-bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-glucuronate) : 75,0 mg
    - Agar agar bactériologique : 9,0 g
    pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25 °C : 7,2 ± 0,2.

    56,50 € HT
  10. TRYPTICASE SOJA POLYSORBATE LECITHI. GELOSE BD 255320-500G

    Réf.: 239978  416.255320.54

    Difco™ Gélose Tryptique de soja avec lécithine et polysorbate 80 (gélose d'essai de la teneur microbienne)

    Cette gélose peut être utilisée pour établir et surveiller les techniques et les calendriers de nettoyage.Le prélèvement d’échantillons dans des zones identiques avant et après le traitement au désinfectant donne des données utiles pour évaluer les procédures de nettoyage dans l’assainissement de l’environnement. Tryptic (Trypticase) Soy Agar with Lecithin and Polysorbate 80 est recommandé pour le test de limite microbiologique sur les produits cosmétiques miscibles à l’eau contenant des conservateurs.

    Composition (pour 1L de préparation):

    Digestat pancreatique de caséine........................................ 15.0 g
    Peptone de soja................................................................. 5.0 g
    Chlorure de sodium.......................................................... 5.0 g
    Lecithine........................................................................ 0.7 g
    Polysorbate 80............................................................. 5.0 g
    Agar.......................................................................... 15.0 g

    206,60 € HT

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On retrouve 4 principaux types de milieux :

  • Les milieux standards qui permettent la croissance des micro-organismes sans besoin particulier, tel que PCA (Plate Count Agar), TSA (Tryptic Soy Agar) ou bouillon nutritif.
     
  • Les milieux enrichis sont caractérisés par l’ajout d’un composé particulier permettant la croissance de micro-organismes exigeant ce composé qui peut être du sang, du sérum, du jaune d’œuf, du lait …
     
  • Les milieux sélectifs permettent la croissance d’une espèce de micro-organismes et donc son isolement, tandis que les autres espèces sont inhibées. Un milieu de culture est rendu sélectif pour une espèce microbienne lorsque sont seules satisfaites les exigences nutritives et les conditions de développement particulières à cette espèce. Les principaux facteurs de sélection microbienne utilisés seuls ou en association sont : la température d'incubation, le pH du milieu, la faculté d'utiliser une source nutritive déterminée (azote, carbone, …) et la résistance à l'action bactéricide d'un antiseptique ou d'un antibiotique.
     
  • Les milieux de culture chromogènes permettent l’identification précise de micro-organismes par coloration des colonies. Le principe de ce milieu, repose sur la présence d'un ou plusieurs substrats chromogènes permettant la coloration des colonies à la suite de sa dégradation par des enzymes bactériennes spécifiques et de la libération du chromophore.

Les milieux de culture sont disponibles soit sous forme déshydratée en poudre ou prêt à l’emploi en bouillon ou gélose. Les milieux sont solidifiés grâce à la présence d’agar pour l’obtention d’une gélose, tandis que les bouillons n’en contiennent pas.

Milieux de culture déshydratés

Le format déshydraté assure une composition constante du milieu et un stockage simplifié, car il n’est pas nécessaire de le conserver réfrigéré.
Pour l’utilisation, il est nécessaire de le reconstituer en mélangeant la poudre avec un volume d’eau préconisé, l’homogénéiser, le dissoudre par chauffage et le répartir dans des flacons ou des tubes en verre en vue d’être stérilisé par autoclavage. Une fois refroidi, le milieu de culture peut être additionné d’un supplément qui ne supporte pas l’autoclavage, et ensuite il peut être distribué dans des tubes ou des boîtes de pétri.

Milieux de culture prêts à l’emploi

L’avantage du format prêt à l’emploi c’est qu’il n’y a pas de préparation préalable à réaliser, hormis la remise en surfusion pour liquéfier le milieu et le distribuer dans des tubes ou des boîtes de pétri. Par contre ce type de milieux possède une durée de conservation beaucoup plus courte que les milieux déshydratés et le stockage est plus complexe.

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