Milieux de culture

Une gélose pour le dénombrement au lait écréme est utilisé pour la numération des germes dans le lait et les produits laitiers.

Préparation :
Dissoudre 24,5 g/l dans de l’eau déminaralisée. Chauffer au bain-marie tout en agitant fréquemment jusqu’à complète dissolution. Autoclaver à 121 °C/15 min.

Composition :
Peptone de caséine : 5,0
Extrait de levure : 2,5
Glucose : 1,0
Lait écrèmé en poudre : 1,0
Agar agar : 15,0
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C

Le milieu Baird Parker + RPF (Rabbit Plasma Fibrinogen) est un milieu sélectif utilisé pour l'isolement des Staphylocoques à coagulase-positive, notamment dans les aliments comme recommandé dans la norme ISO 6888-2.
Les boîtes de pétri de Baird Parker + RPF doivent être ensemencées avec un échantillon de 0,1 ml de solution bactérienne (à différentes dilutions). Etaler l'inoculum, le laisser sécher puis inverser les plaques pour incubation.

Le milieu se présente ici en boîte de pétri pré-coulée (22 ±1 ml) de 90 mm.

Composition :

Digest pancréatique de la caséine.............. 10,0 g/l
Extrait de viande........................................ 5,0 g/l
Extrait de levure......................................... 1,0 g/l
L-Glycine................................................. 12,0 g/l
Pyruvate de sodium.................................. 10,0 g/l
Chlorure de lithium..................................... 5,0 g/l
Agar........................................................ 17,0 g/l
Fibrinogène bovin....................................... 5,0 g/l
Plasma de lapin - EDTA............................... 25 ml
Inhibiteur de trypsine............................... 0,025 g/l
Tellurite de potassium.............................. 0,025 g/l

Agar de type E, adapté à la culture de cellules végétales

L'agar, un polysaccharide d'algue, a des propriétés gélifiantes. La structure de l'agar a été étudiée.

L'agar a été utilisé comme réactif pour les études suivantes :
- Études sur les cultures de cellules végétales.
- Comme complément de milieu pour la croissance d'Arabidopsis thaliana de type sauvage (écotype Columbia) et de graines transgéniques.
- Pour la solidification du milieu de culture des embryons somatiques de chêne-liège.

Bouillon de MacCONKEY.

Milieu de culture sélectif utilisé comme test présomptif pour les bactéries E. coli et coliformes et pour déterminer le titre en E. coli ou coliformes du lait, de l'eau et d'autres matières selon MacCONKEY et HILL (1901).

Supplément sélectif pour bouillon Fraser Merck.

Gélose Mueller Hinton BIOKAR - 500G

La gélose de Mueller Hinton est reconnue par tous les experts comme étant le milieu de référence pour l’étude de la sensibilité des germes aux antibiotiques et aux sulfamides. Elle constitue un excellent milieu de base pour la fabrication de géloses au sang.

Composition : 
Pour 1L de milieu.

Hydrolysat acide de caséine : 17,5 g
Extrait de viande : 2,0 g
Amidon soluble : 1,5 g
Agar agar bactériologique : 17,0 g
pH final à 25°C : 7,3 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 38,0 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir en tubes ou en flacons.
4. Stériliser à l’autoclave à 115 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir le milieu à 44-47 °C.
6. Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide.
7. L’épaisseur de la gélose doit être impérativement de 4 mm.
8. Laisser solidifier sur une surface froide.
9. Faire sécher les boîtes à l’étuve, couvercle entrouvert de façon à éviter la formation de gouttelettes d’eau à la surface de la gélose, phénomène pouvant altérer les qualités de diffusabilité du milieu. 

Normes : NF U47-106, NF EN ISO 10272-1, XP CEN ISO/TS 10272-3, NF U47-107.

LB Miller Gelose BD 244520-500G

La gélose LB, Miller est utilisée pour le maintien et le développement d'Escherichia coli en procédures de microbiologie moléculaire.

Ce milieu LB Miller est  riche en nutriments et est adapté pour la croissance des souches recombinantes. E. coli se développe plus rapidement car ils fournissent aux bactéries des acides aminés, des précurseurs de nucléotides, vitamines et autres métabolites que le micro-organisme devrait autrement synthétiser.

Les Apports du milieu LB Miller :
- Les peptones fournissent l'azote et le carbone.
- L'extrait de levure apporte la source de vitamine et d'oligo-élements
- Le chlorure de sodium apporte ions Na et ainsi l'équilibre osmotique
- L'agar est l'agent solidifiant

Composition du milieu LB Miller pour 1 litre:
- Tryptone : 10g
- Extrait de levure : 5g
- Chlorure de soduim : 10g
- Agar : 15g

Gélose Wilkins-Chalgren BIOKAR - 500G

La gélose de Wilkins-Chalgren est utilisée pour déterminer les concentrations minimales inhibitrices d’antibiotiques pour les bactéries anaérobies, par la technique en dilution. Elle permet également la culture abondante et l’isolement des germes anaérobies.

Composition : 
Pour 1L de milieu.

Tryptone : 10,0 g
Peptone pancréatique de gélatine : 10,0 g
Extrait autolytique de levure : 5,0 g
L-arginine : 1,0 g
Glucose : 1,0 g
Hémine : 5,0 mg
Vitamine K1 : 0,5 mg
Pyruvate de sodium : 1,0 g
Chlorure de sodium : 5,0 g
Agar agar bactériologique : 15,0 g
pH final à 25°C : 7,1 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 48,0 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution.
3. Répartir en tubes ou en flacons.
4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir le milieu à 44-47 °C.
6. Si besoin, ajouter les antibiotiques à tester.
7. Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide.

La méthode COMPASS® Listeria est une méthode alternative rapide de recherche de Listeria monocytogenes et de Listeria spp, dans les produits d’alimentation humaine et échantillons de l’environnement. Apres une premiere étape d’enrichissement sélectif en bouillon Fraser ½, une seconde etape de repiquage sur COMPASS® Listeria Agar. L’enrichissement peut être réalisé à 37°C pendant 18 à 24 heures, ou à 30°C pendant 22 à 28 heures. 

La méthode est certifiée NF VALIDATION, selon le protocole de validation NF EN ISO 16140-2 de 2016 pour tous produits d’alimentation humaine et les échantillons de l’environnement de production industrielle. 

Le SPS agar est utilisé pour l’isolement et la numération de Clostridium perfringens et Clostridium botulinum dans les denrées alimentaires.

Préparation :
Dissoudre 40 g/l . Autoclaver 15 minutes à 120 °C.
Incubation 24 à 48 h à 37 °C ou 46 °C en anaérobiose.

Composition :
Peptone de caséine : 15,0
Extrait de levure : 10,0
Citrate ferrique : 0,5
Sulfite de sodium : 0,5
Sulfate de polymyxine B : 0,01
Sulfadiazine sodique : 0,12
Agar agar : 13,9
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C