Milieux de culture

Fraser 1/2  Supplément 

Le Supplément Fraser1/2 se compose de deux suppléments lyophilisés distincts utilisés pour la préparation du bouillon Fraser Base (réf. 610375, 620375).

Le milieu complet est utilisé pour l'enrichissement sélectif et l'identification présomptive de Listeria spp à partir d'échantillons alimentaires et environnementaux.

L'acryflavine et l'acide nalidixique inhibent la croissance de la flore microbienne qui l'accompagne. Le citrate ferrique d'ammonium permet la détection de l'esculine.

Un noircissement du milieu est le résultat de l'hydrolyse par Listeria spp.

Chaque kit contient:

• 10 flacons de supplément A de Fraser 1/2 lyophilisé

• 10 flacons de supplément B de Fraser 1/2 lyophilisé

• 1 feuille d'instructions

Agar microbiologique testé, adapté à la culture de cellules végétales, adapté à la culture de cellules, en poudre

L'agar est un colloïde hydrophile obtenu à partir d'algues marines (Rhodophyceae). Il est soluble dans l'eau bouillante et est important pour le domaine microbiologique. L'agar a été utilisé dans les milieux de croissance des plantes.
Concentration de travail typique : 6-12g/L.

TRYPTOPHANE BOUILLON 09136 - 500G

Tryptophane bouillon est un milieu pour réaliser le test indole pour confirmer la présence d'E. coli dans l'eau selon la norme EN IS0 9308-1:2000.

Composition :

hydrolysat enzymatique de caséine, 10.0 g/L
chlorure de sodium, 5.0 g/L
DL-tryptophane, 1.0 g/L

OGYE - EXTRAIT DE LEVURE, GLUCOSE, OXYTETRACYCLINE BASE CM0545B - 500G

La gélose OGYE est recommandée pour la sélection et le dénombrement des levures et des moisissures dans les denrées alimentaires. Le milieu utilisant l'oxytétracycline comme agent sélectif.

Preparation:

Suspendre 18,5 g dans 500 ml d'eau distillée et porter à ébullition jusqu'a complète dissolution. Stériliser en autoclave à 115°C pendant 10 minutes. Laisser le milieu refroidir à 50°C et ajouter aseptiquement le contenu d'un flacon d'Oxytetracycline GYE Selective Supplement (201010) reconstitué comme indiqué. Mélanger soigneusement et verser dans des boîtes de Pétri stériles.

Le pH de ce milieu doit être de 7,0±0,2 à 25°C.

Composition en g/L :

Extrait de levure: 5.0

Glucose: 20.0

Agar: 12.0

pH 7.6 ± 0.2 

Gélose M17 selon TERZAGHI.

Supports proposés par TERZAGHI et SANDINE (1975) pour la culture et le dénombrement des streptocoques lactiques dans le lait et les produits laitiers et pour la différenciation des bactériophages infectant les streptocoques lactiques

GELOSE UREE DE CHRISTENSEN - OXOID - CM0053B - 500G

La gélose urée de Christensen est utilisé pour la détection de l'activité uréasique rapide pour mettre en evidence la présence de certaines autres Enterobacteriaceae

Les microorganisme producteurs d'uréase hydrolysent l'urée pour former de l'ammoniac, et le milieu passe de l'orange au rose.

Composition en g/L :

Peptone: 1.0

Glucose : 1.0

Sodium chloride : 5.0

Disodium phosphate : 1.2

Potassium dihydrogen phosphate : 0.8

Rouge de phenol : 0.012

Agar : 15.0

pH 6.8 ± 0.2

La novobiocine, un inhibiteur de Hsp90, est utilisée pour étudier l'inhibition des protéines de choc thermique et pour produire de l'ADN plasmidique surenroulé positif.

Pour la production d'ADN plasmidique positivement surenroulé. Inhibiteur de l'ADN gyrase bactérien et de l'ADN topoisomérase eucaryote. Inhibiteur de l'ADN-polymérase ARN-dépendante des rétrovirus.

Le supplément BRUCELLA  est un supplément sélectif pour l’isolement de Brucella spp à partir du lait.
Le supplément sélectif est constitué d’un mélange lyophilisé d’antibiotiques: Polymyxine B, Bacitracine, Cycloheximide, Acide nalidixique, Nystatine, Vancomycine.
Le supplément BRUCELLA est employé pour l’enrichissement sélectif des milieux Brucella Agar Base, Columbia Agar Base, Blood Agar Base.

La croissance lente des espèces de Brucella requiert la présence, dans le milieu, d’agents sélectifs qui préviennent la croissance excessive des microorganismes contaminants présents dans l’échantillon à étudier. 

Composition du supplément BRECELLA :
- Polymyxine B est un antibiotique à large spectre
- Bacitracine interfère avec la synthèse de la paroi bactérienne et elle est essentiellement active sur les bactéries à Gram positif
- Cycloheximide et la Nystatine ont une activité antifongique
-  Acide nalidixique est une quinolone active contre les bactéries à Gram négatif
-  Vancomycine inhibe la synthèse de la paroi cellulaire des bactéries à Gram positif

Le Bouillon d’enrichissement recommandé pour la recherche d’E. coli. 0157 : H7 dans les produits alimentaires tout particulièrement dans les produits laitiers.

Préparation :
Dissoudre 36,7 g/litre d’eau déminéralisée. Autoclaver à 121 °C/15 min.

Emploi :
Inoculer le bouillon E.C. modifié avec l'échantillon à tester (généralement 25 g de l'échantillon dans 225 ml de bouillon). Incuber à 35-37 °C/18 à 24 h. Ensuite ensemencer 0,1 ml de ce bouillon sur un agar sélectif pour E.COLI 0157 : H7.

Composition :
Peptones : 20,0
Chlorure de sodium : 5,0
Sels bilaires n°3 : 1,12
Lactose : 5,0
Di-potassium hydrogénophosphate : 4,0
Di-hydrogénophosphate potassium : 1,5
Novobiocine : 0,02
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C

La gélose de base Clostridium perfringens est un milieu utilisé seul ou avec des agents sélectifs pour l'identification présomptive de Clostridium perfringens provenant d'échantillons cliniques, d'aliments, d'eau et d'échantillons environnementaux.

La D-Cyclosérine peut être ajoutée à ce milieu de culture pour se conformer aux spécifications données par l'ISO 7937, l'ISO 14189 et l'APHA.

Lorsqu'il est complété avec de la polymyxine B et de la kanamycine, le milieu est conforme à la formulation développée par Shahidi et Ferguson.

S'il est utilisé sans supplément ajouté, ce milieu est connu sous le nom de gélose au sulfate de fer et est recommandé par l'ISO 15213 pour le dénombrement de bactéries sulfito-réductrices poussant dans des conditions anaérobies.