Milieux de culture

Dichloran Glycerol (DG18) Agar

Dichloran Glycerol (DG18) Agar est un milieu utilisé pour l'isolement sélectif et le dénombrement des levures et moisissures dans les aliments.
Ce milieu est conforme à la norme ISO 21527-2 pour l'examen microbiologique des produits ayant une activité de l'eau inférieur ou égal à 0,95 tels que fruits secs, gâteaux, confitures, viande séchée, poisson salé, céréales, produits céréaliers, farine, noix, épices et condiments, etc.

Le Bouillon d’enrichissement recommandé pour la recherche d’E. coli. 0157 : H7 dans les produits alimentaires tout particulièrement dans les produits laitiers.

Préparation :
Dissoudre 36,7 g/litre d’eau déminéralisée. Autoclaver à 121 °C/15 min.

Emploi :
Inoculer le bouillon E.C. modifié avec l'échantillon à tester (généralement 25 g de l'échantillon dans 225 ml de bouillon). Incuber à 35-37 °C/18 à 24 h. Ensuite ensemencer 0,1 ml de ce bouillon sur un agar sélectif pour E.COLI 0157 : H7.

Composition :
Peptones : 20,0
Chlorure de sodium : 5,0
Sels bilaires n°3 : 1,12
Lactose : 5,0
Di-potassium hydrogénophosphate : 4,0
Di-hydrogénophosphate potassium : 1,5
Novobiocine : 0,02
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C

Trypticase Soja Agar BD™

Trypticase Soja Agar BD™ (TSA) est un milieu à usage général est utilisée pour l'isolement et la culture de microorganismes exigeants ou non. 
Il n'est pas recommandé de l'utiliser pour l'isolement primaire de micro-organismes à partir d'échantillons cliniques, mais peut être utilisé pour la sous-culture de souches bactériennes isolées à partir d'échantillons cliniques afin d'obtenir des cultures pures et pour une différenciation et une identification supplémentaires.

Composition (pour 1Litre) :

Digest pancréatique de caséine 15,0 g
Digest papaic de soja 5.0
Chlorure de sodium 5,0
Gélose 15,0
pH 7,3 ± 0,2

Sels de mer

NutriSelect™ Basic

Le sel marin est un sel non raffiné, qui est récolté dans l'océan et dans les gisements d'eau salée. Il est utilisé pour maintenir l'équilibre en sel de l'organisme.

Habituellement utilisé à environ 40 g/L pour la culture des bactéries marines.
Après dissolution, ajuster le pH à 8,2 en utilisant une solution 0,1 N d'hydroxyde de sodium ou d'acide chlorhydrique.

Gélose R2A Merck - 500g

La gélose R2A est un milieu nutritif pour la détermination du nombre total de bactéries hétérotrophes dans l'eau potable.
C'est un milieu à faible teneur en nutriments qui, associé à une température d'incubation basse et un temps d'incubation prolongé, est particulièrement adapté à la récupération des bactéries stressées et tolérantes au chlore de l'eau potable. Le milieu nutritif est conforme aux recommandations des méthodes standards (USEPA) et de la Pharmacopée Européenne (2014) pour l'examen des eaux.

Mode d'action

La faible concentration d'extrait de levure, d'hydrolisat de caséine, de peptone et de glucose permet à un large spectre de bactéries de se développer sans que les bactéries à croissance rapide suppriment les espèces à croissance lente, comme ce serait le cas sur des milieux riches en nutriments comme par ex. Gélose PCA.
La teneur en amidon et en pyruvate permet notamment aux bactéries lésées de se développer à nouveau plus rapidement.

Composition :

Extrait de levure : 0,5 g/L
Protéose Peptone : 0,5 g/L
Hydrolysat de caséine : 0,5 g/L
Glucose : 0,5 g/L
Amidon soluble : 0,5 g/L
Pyruvate de sodium : 0,3 g/L
K2HPO4 : 0,3 g/L
MgSO4, anhydre : 0,024 g/L
Agar-Agar : 15 g/L

Préparation :

1. Suspendre 18,2 g dans 1 L d'eau déminéralisée et chauffer au bain-marie bouillant ou à la vapeur jusqu'à dissolution complète du milieu.
2. Autoclaver 15 min à 121°C.
3. Refroidir à 45–50 °C et verser dans des boîtes de Pétri stériles.
4. L'aspect du milieu est clair à légèrement trouble et jaunâtre.

La valeur du pH à 25 °C est comprise entre 7,0 et 7,4.

JAUNE D'OEUF TELLURITE EMULS OXOID SR0054C-100ML

Le jaune d'oeuf au tellurite est un ingrédient pour milieu de Baird Parker.
Dose d’emploi 5 ml pour 100 ml de milieu.
Conservation de 2 à 8 °C à l'obscurité.

Le GLUCOSE est utilisé comme une source d'énergie pour la croissance bactérienne.
Plus particulièrement pour les bactéries pour les tests de fermentation  (Salmonellatyphimurium et Escherichia coli fermentent le glucose).

 Dans les milieux liquides, on utilise généralement une concentration de 0,5 % .
Pour les géloses, des concentrations élevées sont utilisées pour la préparation de milieu de culture.

Gélose RCM de Hirsch Grinsted BIOKAR – 500G

La gélose RCM (Reinforced Clostridial Medium) est un milieu non sélectif utilisé pour la culture, l’isolement et la numération des Clostridia, des autres germes anaérobies, des Lactobacilles dans les prélèvements biologiques, les produits laitiers et les autres produits alimentaires.

Composition : 
Pour 1L de milieu

Tryptone : 10,0 g
Extrait de viande : 10,0 g
Extrait autolytique de levure : 3,0 g
Cystéine (chlorhydrate) : 0,5 g
Glucose : 5,0 g
Amidon soluble : 1,0 g
Chlorure de sodium : 5,0 g
Acétate de sodium : 3,0 g
Agar agar bactériologique : 15,0 g
pH final à 25°C : 6,8 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 52,5 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir en tubes ou en flacons.
4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir à 44-47 °C.

La gélose au Rouge de phénol et au Mannitol permet de mettre en évidence les bactéries basées sur des réactions de fermentation du mannitol.

L'avantage d'un milieu de fermentation solide est qu'il permet d'observer la fermentation du mannitol en conditions aérobies et anaérobies.

Composition pour une préparation de 1 Litre :
Protease Peptone : 10 g
Extrait de boeuf : 1 g
D-Mannitol : 10 g
Chlorure de Sodium : 5 g
Agar : 15 g
Rouge de phénol : 25 mg

Le peptone fournit le carbone et l'azote nécessaires à une bonne la croissance d'une grande variété d'organismes.
Chlorure de sodium maintient l'équilibre osmotique du milieu.
L'agar est l'agent solidifiant.
Le rouge de phénol est l'indicateur de pH, en virant de rouge-orange à jaune lorsque de l'acide est produit pendant la fermentation.
Le milieu reste rouge ou devient alcalin (rouge plus foncé).

MIDDLEBROOK 7H 10 supplément

Le supplément MIDDLEBROOK 7H 10 (OADC) est un supplément de croissance liquide composé d'acide oléique, d'albumine bovine, de glucose, de catalase et de sodium chlorure

A utiliser en complément du milieu de culture MIDDLEBROOK 7H 10 AGAR BASE code 611022 ou 621022, ou MIDDLEBROOK 7H 11
AGAR BASE cod. 610213 ou 620213 pour la culture de mycobactéries.