Milieux de culture

Le CGA ou YGC est utilisé pour la recherche et dénombrement des Levures et moisissures dans les produits alimentaires.

Préparation :
Dissoudre 40 g/l
Autoclaver à 120 °C/15 min
Incuber à 20-25 °C/3 à 5 jours

Lorsque l'on soupçonne une présence importante de bactéries Gram-négatif, il est recommandé d'ajouter à 100 ml de milieu de culture, ramené à 47 °C, 10 ml d'une solution de Gentamicine à 1mg/ml

Composition :
Extrait de levure : 5,0
Glucose : 20,0
Chloramphénicol : 0,1
Agar agar : 14,9
pH final : 6,6 ± 0,2 à 25 °C

Le bouillon de Giolitti et Cantoni avec Tween 80 est un milieu d’enrichissement sélectif utilisé pour les recherche et dénombrement des staphylocoques à coagulase positive dans les produits alimentaires. Il est plus particulièrement adapté au contrôle des matrices (produits laitiers secs par exemple) supposées contenir ces germes, stressés et/ou en petits nombres. 

PREPARATION

Milieu simple concentration

- Ajouter dans chaque tube 0,1 mL d’une solution aqueuse de tellurite de potassium à 1% préalablement stérilisée par filtration.
- Transférer 1 mL d'inoculum dans chaque tube.
- Bien mélanger en évitant l’incorporation d’air.
- Incuber les tubes en anaérobiose à 37°C, pendant 24 et 48 heures (en déposant, par exemple et avec précaution, un bouchon de gélose blanche stérile, préalablement fondue et refroidie entre 44 et 47°C). 

COMPOSITION

Pour 1 litre de milieu de base :

- Tryptone : 10,0 g
- Extrait de viande : 5,0 g
- Extrait de levure : 5,0 g
- Glycine : 1,2 g
- Mannitol : 20,0 g
- Pyruvate de sodium : 3,0 g
- Chlorure de sodium : 5,0 g
- Chlorure de lithium : 5,0 g
- Tween 80 : 1,0 g

L'extrait de levure est un autolyse déshydraté de levures utilisées dans les milieux de culture à la place ou en tant qu'adjuvant de l'extrait de boeuf.

Une gélose pour le dénombrement au lait écréme est utilisé pour la numération des germes dans le lait et les produits laitiers.

Préparation :
Dissoudre 24,5 g/l dans de l’eau déminaralisée. Chauffer au bain-marie tout en agitant fréquemment jusqu’à complète dissolution. Autoclaver à 121 °C/15 min.

Composition :
Peptone de caséine : 5,0
Extrait de levure : 2,5
Glucose : 1,0
Lait écrèmé en poudre : 1,0
Agar agar : 15,0
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C

Agar de type E, adapté à la culture de cellules végétales

L'agar, un polysaccharide d'algue, a des propriétés gélifiantes. La structure de l'agar a été étudiée.

L'agar a été utilisé comme réactif pour les études suivantes :
- Études sur les cultures de cellules végétales.
- Comme complément de milieu pour la croissance d'Arabidopsis thaliana de type sauvage (écotype Columbia) et de graines transgéniques.
- Pour la solidification du milieu de culture des embryons somatiques de chêne-liège.

Bouillon de MacCONKEY.

Milieu de culture sélectif utilisé comme test présomptif pour les bactéries E. coli et coliformes et pour déterminer le titre en E. coli ou coliformes du lait, de l'eau et d'autres matières selon MacCONKEY et HILL (1901).

Un flacon Merck de supplément sélectif pour MSRV semi-solide base permet de supplémenter 500 ml de milieu MSRV semi-solide Merck 9878.
A chaque flacon Merck doit être ajouté 1 ml d’eau stérile.

Novobiocine : 0,010

Milieu chromogénique pour la détection des E. coli et des coliformes dans des échantillons d’eau. Les coliformes sont la preuve de contamination biologique, de l’environnement ou des matières fécales. La contamination fécale, en raison de coliformes provenant de déchets d’origine animale, se compose principalement d’Escherichia coli et Klebsielles thermotolérants.

Le milieu se présente sous forme de sachet de poudre pré-dosée. Ajouter 1 sachet à votre échantillon d'eau à analyse puis mettre à incuber 18 h à 24 h à 37°C. Le milieu deviendra vert à bleu-vert en présence de Escherichia coli, jaune en présence de Coliforme et incolore au contact d'autres germes.

Ce milieu de culture a également été conçu pour des tests dans des zones où ni les incubateurs, ni les lampes UV ne sont disponibles. L’incubation peut être effectuée à température ambiante (incubation plus longue) et les résultats sont lus à la lumière du jour.

Gélose Mueller Hinton BIOKAR - 500G

La gélose de Mueller Hinton est reconnue par tous les experts comme étant le milieu de référence pour l’étude de la sensibilité des germes aux antibiotiques et aux sulfamides. Elle constitue un excellent milieu de base pour la fabrication de géloses au sang.

Composition : 
Pour 1L de milieu.

Hydrolysat acide de caséine : 17,5 g
Extrait de viande : 2,0 g
Amidon soluble : 1,5 g
Agar agar bactériologique : 17,0 g
pH final à 25°C : 7,3 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 38,0 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir en tubes ou en flacons.
4. Stériliser à l’autoclave à 115 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir le milieu à 44-47 °C.
6. Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide.
7. L’épaisseur de la gélose doit être impérativement de 4 mm.
8. Laisser solidifier sur une surface froide.
9. Faire sécher les boîtes à l’étuve, couvercle entrouvert de façon à éviter la formation de gouttelettes d’eau à la surface de la gélose, phénomène pouvant altérer les qualités de diffusabilité du milieu. 

Normes : NF U47-106, NF EN ISO 10272-1, XP CEN ISO/TS 10272-3, NF U47-107.

GIOLITTI-CANTONI BOUILLON  20 X 10ML

Le bouillon Giolitti-Cantoni est utilisé pour la récupération et le dénombrement de faibles nombres de staphylocoques à coagulase positive dans les aliments selon la norme ISO, FIL-IDF et EN.
La croissance des staphylocoques est favorisée par le pyruvate, la glycine et surtout par une concentration élevée de mannitol.
L'ajout de Polysorbate 80 est nécessaire pour la réussite de la récupération du Staphylococcus aureus.

Généralement, la croissance des staphylocoques peut être reconnue par un noircissement ou des précipités noirs dans le milieu de culture dus à la réduction de la tellurite en tellure métallique.