Milieux de culture

GELOSE UREE DE CHRISTENSEN - OXOID - CM0053B - 500G

La gélose urée de Christensen est utilisé pour la détection de l'activité uréasique rapide pour mettre en evidence la présence de certaines autres Enterobacteriaceae

Les microorganisme producteurs d'uréase hydrolysent l'urée pour former de l'ammoniac, et le milieu passe de l'orange au rose.

Composition en g/L :

Peptone: 1.0

Glucose : 1.0

Sodium chloride : 5.0

Disodium phosphate : 1.2

Potassium dihydrogen phosphate : 0.8

Rouge de phenol : 0.012

Agar : 15.0

pH 6.8 ± 0.2

Milieu pour le test de présence/absence (MUG), en bouteille stérile
Les tests de présence-absence sont un moyen pratique de détecter les coliformes et les E. Coli dans votre système d'eau.

Le supplément BRUCELLA  est un supplément sélectif pour l’isolement de Brucella spp à partir du lait.
Le supplément sélectif est constitué d’un mélange lyophilisé d’antibiotiques: Polymyxine B, Bacitracine, Cycloheximide, Acide nalidixique, Nystatine, Vancomycine.
Le supplément BRUCELLA est employé pour l’enrichissement sélectif des milieux Brucella Agar Base, Columbia Agar Base, Blood Agar Base.

La croissance lente des espèces de Brucella requiert la présence, dans le milieu, d’agents sélectifs qui préviennent la croissance excessive des microorganismes contaminants présents dans l’échantillon à étudier. 

Composition du supplément BRECELLA :
- Polymyxine B est un antibiotique à large spectre
- Bacitracine interfère avec la synthèse de la paroi bactérienne et elle est essentiellement active sur les bactéries à Gram positif
- Cycloheximide et la Nystatine ont une activité antifongique
-  Acide nalidixique est une quinolone active contre les bactéries à Gram négatif
-  Vancomycine inhibe la synthèse de la paroi cellulaire des bactéries à Gram positif

Le Bouillon d’enrichissement recommandé pour la recherche d’E. coli. 0157 : H7 dans les produits alimentaires tout particulièrement dans les produits laitiers.

Préparation :
Dissoudre 36,7 g/litre d’eau déminéralisée. Autoclaver à 121 °C/15 min.

Emploi :
Inoculer le bouillon E.C. modifié avec l'échantillon à tester (généralement 25 g de l'échantillon dans 225 ml de bouillon). Incuber à 35-37 °C/18 à 24 h. Ensuite ensemencer 0,1 ml de ce bouillon sur un agar sélectif pour E.COLI 0157 : H7.

Composition :
Peptones : 20,0
Chlorure de sodium : 5,0
Sels bilaires n°3 : 1,12
Lactose : 5,0
Di-potassium hydrogénophosphate : 4,0
Di-hydrogénophosphate potassium : 1,5
Novobiocine : 0,02
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C

La gélose de base Clostridium perfringens est un milieu utilisé seul ou avec des agents sélectifs pour l'identification présomptive de Clostridium perfringens provenant d'échantillons cliniques, d'aliments, d'eau et d'échantillons environnementaux.

La D-Cyclosérine peut être ajoutée à ce milieu de culture pour se conformer aux spécifications données par l'ISO 7937, l'ISO 14189 et l'APHA.

Lorsqu'il est complété avec de la polymyxine B et de la kanamycine, le milieu est conforme à la formulation développée par Shahidi et Ferguson.

S'il est utilisé sans supplément ajouté, ce milieu est connu sous le nom de gélose au sulfate de fer et est recommandé par l'ISO 15213 pour le dénombrement de bactéries sulfito-réductrices poussant dans des conditions anaérobies.

BD Legionella Agar sans cystéine avec pimaricine (BCYE) est un milieu de culture témoin permettant la détection de la présence de bactéries autres que Legionella qui peuvent également apparaître sur les deux autres milieux BD Legionella Agar (NEN) et BD Legionella Agar (NEN) sans antibiotiques et avec Pimaricine.
Ce milieu est coulé en boîtes de 90mm BD Stacker™.

Composition (pour 1Litre) :

Extrait de levure : 10,0 g
Pyrophosphate ferrique : 0,25 g
Tampon ACES : 10,0 g
Charbon activé : 2,0 g
Alpha-cétoglutarate : 1,0 g
Gélose : 15,0 g
Pimaricine : 0,067 g
pH 6,8 ± 0,2

Sels de mer

NutriSelect™ Basic

Le sel marin est un sel non raffiné, qui est récolté dans l'océan et dans les gisements d'eau salée. Il est utilisé pour maintenir l'équilibre en sel de l'organisme.

Habituellement utilisé à environ 40 g/L pour la culture des bactéries marines.
Après dissolution, ajuster le pH à 8,2 en utilisant une solution 0,1 N d'hydroxyde de sodium ou d'acide chlorhydrique.

Gélose R2A Merck - 500g

La gélose R2A est un milieu nutritif pour la détermination du nombre total de bactéries hétérotrophes dans l'eau potable.
C'est un milieu à faible teneur en nutriments qui, associé à une température d'incubation basse et un temps d'incubation prolongé, est particulièrement adapté à la récupération des bactéries stressées et tolérantes au chlore de l'eau potable. Le milieu nutritif est conforme aux recommandations des méthodes standards (USEPA) et de la Pharmacopée Européenne (2014) pour l'examen des eaux.

Mode d'action

La faible concentration d'extrait de levure, d'hydrolisat de caséine, de peptone et de glucose permet à un large spectre de bactéries de se développer sans que les bactéries à croissance rapide suppriment les espèces à croissance lente, comme ce serait le cas sur des milieux riches en nutriments comme par ex. Gélose PCA.
La teneur en amidon et en pyruvate permet notamment aux bactéries lésées de se développer à nouveau plus rapidement.

Composition :

Extrait de levure : 0,5 g/L
Protéose Peptone : 0,5 g/L
Hydrolysat de caséine : 0,5 g/L
Glucose : 0,5 g/L
Amidon soluble : 0,5 g/L
Pyruvate de sodium : 0,3 g/L
K2HPO4 : 0,3 g/L
MgSO4, anhydre : 0,024 g/L
Agar-Agar : 15 g/L

Préparation :

1. Suspendre 18,2 g dans 1 L d'eau déminéralisée et chauffer au bain-marie bouillant ou à la vapeur jusqu'à dissolution complète du milieu.
2. Autoclaver 15 min à 121°C.
3. Refroidir à 45–50 °C et verser dans des boîtes de Pétri stériles.
4. L'aspect du milieu est clair à légèrement trouble et jaunâtre.

La valeur du pH à 25 °C est comprise entre 7,0 et 7,4.

Le GLUCOSE est utilisé comme une source d'énergie pour la croissance bactérienne.
Plus particulièrement pour les bactéries pour les tests de fermentation  (Salmonellatyphimurium et Escherichia coli fermentent le glucose).

 Dans les milieux liquides, on utilise généralement une concentration de 0,5 % .
Pour les géloses, des concentrations élevées sont utilisées pour la préparation de milieu de culture.

Gélose RCM de Hirsch Grinsted BIOKAR – 500G

La gélose RCM (Reinforced Clostridial Medium) est un milieu non sélectif utilisé pour la culture, l’isolement et la numération des Clostridia, des autres germes anaérobies, des Lactobacilles dans les prélèvements biologiques, les produits laitiers et les autres produits alimentaires.

Composition : 
Pour 1L de milieu

Tryptone : 10,0 g
Extrait de viande : 10,0 g
Extrait autolytique de levure : 3,0 g
Cystéine (chlorhydrate) : 0,5 g
Glucose : 5,0 g
Amidon soluble : 1,0 g
Chlorure de sodium : 5,0 g
Acétate de sodium : 3,0 g
Agar agar bactériologique : 15,0 g
pH final à 25°C : 6,8 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 52,5 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir en tubes ou en flacons.
4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir à 44-47 °C.