Milieux de culture

La gélose XLT 4 (Xylose Lysine Tergitol 4) est un milieu sélectif différentiel permettant l'isolement et la détection de Salmonella spp dans un échantillon clinique, environnemental ou alimentaire.
Le Tergitol 4 est ajouté au milieu inhibe la croissance des bactéries gram-positif et de plusieurs bactéries gram-négatif, notamment de Proteus spp.

Après la mise en culture, les colonies de Salmonelle passent du jaune au rouge avec un centre noir pour les H2S positif (la majorité) ou sans centre noir pour les H2S négatif.
Les autres entérobactéries voient leurs colonies repasser du rouge au jaune.

Le milieu se présente ici en boîte de pétri pré-coulée (22 ±1 ml) de 90 mm.

Composition :

Protéose-peptone...................................... 1,6 g/l
Extrait de levure......................................... 3,0 g/l
L-Lysine.................................................... 5,0 g/l
Xylose..................................................... 3,75 g/l
Lactose..................................................... 7,5 g/l
Sucrose..................................................... 7,5 g/l
Thiosulfate de sodium................................. 6,8 g/l
Citrate d'ammonium ferrique........................ 0,8 g/l
Chlorure de sodium.................................... 5,0 g/l
Rouge de phénol...................................... 0,08 g/l
Agar........................................................ 17.0 g/l
Tétradécysulfate de sodium (Tergitol 4)......... 4,6 ml

Gélose ordinaire de dénombrement

Ce mileu convient parfaitement comme base pour la préparation de milieux de culture.

Bouillon EE MOSSEL selon ISO pour l'enrichissement sélectif des entérobactéries à partir de denrées alimentaires, d'aliments pour animaux et d'autres matières.

Un flacon Merck de supplément sélectif pour MSRV semi-solide base permet de supplémenter 500 ml de milieu MSRV semi-solide Merck 9878.
A chaque flacon Merck doit être ajouté 1 ml d’eau stérile.

Novobiocine : 0,010

Bouillon LB (Miller) MERCK, 500 gr.

Gélose Columbia base BIOKAR – 500G

La gélose Columbia est un milieu très nutritif permettant la culture et l’isolement d’une grande variété de microorganismes et plus particulièrement des germes très exigeants (tels que streptocoques et pneumocoques), à partir de divers prélèvements d’origine animale.

Par addition de sang, d’agents sélectifs ou d’accélérateurs de croissance, il est possible de préparer une grande diversité de milieux adaptés à des utilisations spécifiques.

Composition : 
Pour 1L de milieu.

Polypeptone : 23,0 g
Amidon de maïs : 1,0 g
Chlorure de sodium :  5,0 g
Agar agar bactériologique : 13,5 g 
pH final à 25°C : 7,3 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 42,5 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir en tubes ou en flacons.
4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir à 44-47 °C.
6. Ajouter stérilement 5 à 7 mL de sang défibriné stérile de mouton par flacon.
7. Homogénéiser parfaitement.
8. Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide.
9. Faire sécher les boîtes à l’étuve, couvercle entrouvert.

Normes : NF V08-405, NF U47-108, NF EN ISO 10272-1, NF EN ISO 10272-2.

Le bouillon BBL Enterococcosel est une gélose à l'esculine biliaire avec azide.
Ce bouillon sélectif est utilisée pour la culture des entérocoques.

Les entérocoques et les streptocoques du groupe D hydrolysent l'esculine en esculetine et dextrose.
L'esculétine réagit avec un fer  citrate d'ammonium ferrique, pour former une couleur brun foncé voir noire.
L'Oxgall est utilisé pour inhiber les bactéries gram-positives autres que les entérocoques.
Le sodium azide est un inhibiteur des bactéries Gram negatives.

Composition : 
Préparation pour 1 Litre
Caséine de digestion pancréatique : 17,0 g
Digestion peptique des tissus animaux : 3,0 g
Extrait de levure : 5,0 g
Oxgall : 10, 0 g
Chlore de sodium : 5,0 g
Esculine : 1,0 g
Citrate d'ammonium ferrique : 0,5 g
Sodium azide : 0,25 g
Citrate de sodium : 1,0 g
pH : 7,1 +/-0,2

Gélose Tryptone Soja BIOKAR - 500G

La gélose Tryptone soja est utilisée comme milieu de base destiné à être additionné de sang. Elle est préparée avec des matières premières sélectionnées qui ne la brunissent pas. Elle est spécialement conçue pour mettre en évidence les réactions hémolytiques et pour favoriser la croissance des germes particulièrement exigeants aérobies et anaérobies. 
Elle permet de réaliser le test d’hémolyse sur les colonies présumées de Bacillus cereus, selon la norme ISO 21871.

Composition : 
Pour 1L de milieu.

Tryptone : 15,0 g
Peptone papaïnique de soja : 5,0 g
Chlorure de sodium : 5,0 g
Agar agar bactériologique : 15,0 g
pH final à 25°C : 7,3 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 40,0 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir en flacons de 100 mL.
4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir et maintenir à 44-47 °C.
6. Ajouter stérilement 5 à 7 mL de sang défibriné stérile de mouton par flacon.
7. Homogénéiser parfaitement.
8. Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide.
9. Faire sécher les boîtes à l’étuve, couvercle entrouvert

Norme : NF EN ISO 21871. 

Solution Salmosyst :
- un pré-enrichissement à l’aide du Salmosyst bouillon de base à 37 °C/6 à 8 h

Avantages :
- gain de temps : la solution Salmosyst permet de réduire le temps global (pré-enrichissement + enrichissement) à 24-30 heures
- simplicité d'emploi : après pré-enrichissement de 25 g d’échantillon dans 225 ml de Salmosyst bouillon de base, (37 °C/6 à 8 h) et ajouter 1 comprimé de Salmosyst supplément sélectif à 10 ml de bouillon de pré-enrichissement (37 °C/18 à 22 h)

Suggestion Humeau :
Association Samosyst-milieu de Rambach agar : pré-enrichissement Salmosyst+enrichissement Salmosyst=18 à 24 h. Durée totale de la recherche de 50 heures.

Composition :
Peptone de caséine : 5,0
Peptone de viande : 5,0
Chlorure de sodium : 5,0
Carbonate de calcium : 10,0
Après dissolution un léger précipité dû au carbonate de calcium apparait.

PLATE COUNT AGAR BK 03308-10X200ML

La gélose PCA  est utilisée pour le dénombrement des bactéries aérobies dans les produits alimentaires, les produits d’alimentation animale et les échantillons de l’environnement.
Elle est aussi utilisée pour le dénombrement des microorganismes psychrotrophes.

Les apports nutritives :
- Tryptone,
- l’extrait de levure : sources de vitamines 
- le glucose : source énergétique
favorisent la croissance de la plupart des bactéries à dénombrer.

En bactériologie laitière, il est recommandé d’ajouter 1 g de lait écrémé en poudre par litre de milieu reconstitué (gélose pour dénombrement au lait écrémé ; BK161HA ou BM086).

Composition pour 1 litre de milieu :
- Tryptone : 5,0 g
- Extrait autolytique de levure : 2,5 g
- Glucose :1,0 g
- Agar agar bactériologique : 12,0 g
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25 °C : 7,0 ± 0,2.