Milieux de culture

Lampe UV portative de 4 watts pour la visualisation de la fluorescence dans le cadre des analyses microbiologiques par la méthode Idexx (Colilert, Colilert-18, Enterolert E, Pseudalert). Idéal pour une utilisation sur le terrain.

Le Tergitol 7 agar base est utilisé pour la recherche et le dénombrement des Coliformes sur membrane.

Préparation :
Dissoudre 51,10 g/l
Autoclaver 15 minutes à 115 °C
Après refroidissement à 45/50 °C, ajouter :
5 ml/100 ml d’une solution stérile de TTC à 0,05%
5 ml/100 ml d’une solution de Tergitol 7 à 0,2 %

Composition en g/L.
Peptone de viande : 10,0
Extrait de levure : 6,0
Extrait de viande : 5,0
Lactose : 20,0
Bleu de bromothymol : 0,05
Tergitol 7 : 0,1
Agar agar : 12,7
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C

Ensemencement :
Ensemencer par étalement en surface ou en disposant une membrane
Incuber pendant 21 h ± 3 heures à 36 °C ± 2 °C

Après les étapes habituelles de pré-enrichissement et d’enrichissement, le CHROMagar E.coli, milieu d’isolement innovant, permet d’identifier E.coli par simple coloration des colonies grâce à un marqueur spécifique sur ce milieu :
- les colonies de E.coli prennent une coloration bleue
- les bactéries gram (-) apparaissent incolor

- les bacteries Gram (+) sont inhibées

Milieu de culture utilise dans les prélevements d'aliments transformés, matieres premieres, eau, lait et échantillons environnementaux.

Incubation entre 35 et 37 °C. Lecture à 18 h et 24 h.

Composition en g/L de milieu
Agar : 15,0
Peptone et extrait de levure : 8.3,0
Mélange chromogène : 9,0
Chlorure de sodium : 5,0
 

Flacons stériles de 100 mL avec thiosulfate (inhibition du Chlore), avec fermeture verticale par bande papier. Vendus par 20 unités. La bande papier agit comme une fermeture et comme une étiquette sur laquelle le prélèvement peut être identifié (ID, type, date, heure, lieu de collection,...). 

Utilisé pour les prélèvements d'eau . 

Flacons en plastique PET (Polyéthylène Terephthalate).

La gélose viande foie est utilisée pour le dénombrement des spores de Clostridium sulfito-réducteurs dans les produits alimentaires.

Dissoudre 48 g/l. Autoclaver 20 minutes à 115 °C. Refroidir à 50 °C. Ensemencer les tubes avec 1 ml d'échantillon préalablement chauffé afin de détruire les formes végétatives et d'activer les spores. Incuber 24 h à 37 °C en anaérobiose.

Lecture :
Visualisation des colonies de germes sulfito-réducteurs : noir

Composition :
Base de viande : 30,0
Glucose : 1,0
Sulfite de sodium : 0,5
Citrate ferrique ammoniacal : 0,5
Amidon soluble : 1,0
Agar agar : 8,0
pH final 7,4 ± 0,2

Flacons stériles de 100 mL sans thiosulfate de sodium et avec anti-mousse. Pack de 200.

Fraction soluble d’extrait autolytique de levure, base pour milieux de culture.

La gélose d'isolement Pseudomonas est utilisée avec du glycérol (à ajouter) pour isoler les bactéries Pseudomonas et différencier les Pseudomonas aeruginosa des autres Pseudomonas sur la base de la formation de pigments.

Après les étapes habituelles de pré-enrichissement et d’enrichissement, le milieu CHROMagar STEC, milieu d’isolement innovant, permet d’identifier E. coli productrice de toxine par simple coloration des colonies grâce à un marqueur spécifique sur ce milieu :
- les colonies de E.coli STEC donnent des colonies mauves.
- les Bacteries Gram (+) et autres enterrobactéries donnent des colonies incolores, bleues ou sont inhibées.

Sous lampe UV (365nm)

-E. coli STEC O157: non fluorescente

- E. coli STEC non O157: +/- fluorescente

Incubation entre 35 et 37 °C. Lecture à 18 h et 24 h.

Composition en g/L de milieu

Base (B)
Agar : 15,0
Peptones et extrait de levure : 8.0
Mélange chromogène : 2.6
 

Supplément (S)

mix sélectif : 10mL/L

Avant d'utiliser le milieu, il est possbile de verifier le bon fonctionement de celui-ci en utlisant les souche ci-dessous:

E. coli O157 ATCC 35150 - colonies mauve

E. coli O157 ATCC 700728 - colonie mauve

E coli ATCC 25922 - inhibé

E. faecalis ATCC 29212 - inhibé