Milieux de culture

Bouillon de soja BBL ™ Trypticase ™ (bouillon de soja et de caséine)

Tryptic (Trypticase) Soy Broth (Soybean-Casein Digest Medium) est un support à usage général utilisé dans les procédures qualitatives de culture de microorganismes exigeants ou non, à partir d'une variété d'échantillons cliniques et non cliniques.

Gélose CFC pour le dénombrement des Pseudomonas

La gélose CFC est un milieu sélectif destiné au dénombrement de Pseudomonas spp, contaminant fréquemment rencontré dans les viandes et volailles au cours de leur conservation par réfrigération. 
La formule-type répond à la composition définie dans la norme NF EN ISO 13720, pour le dénombrement des Pseudomonas présomptifs dans les viandes et produits à base de viande.

Préparation:

- Réhydrater le supplément lyophilisé CFC avec 5 mL d’eau stérile.
- Agiter ou vortexer le flacon de façon à obtenir une dissolution complète, tout en évitant la formation de mousse.
- Ajouter stérilement 1 mL de supplément dans chaque flacon de 100 mL de milieu.
- Couler en boîtes de Petri stériles.
- Laisser solidifier sur une surface froide.

Composition:

- Cétrimide : 5,0 mg
- Fusidate de sodium : 5,0 mg
- Céphalotine : 25,0 mg

Difco™ Bouillon de dextrose de pomme de terre

Le bouillon dextrose de pomme de terre est un bouillon à usage général pour les levures et les moisissures qui peut être complété par de l’acide ou des antibiotiques pour inhiber la croissance bactérienne. Il est utilisé dans les méthodes de comptage des plaques pour tester les aliments, les produits laitiers et les cosmétiques.

Composition (pour 1L de préparation):

Amidon de pomme de terre (infusion)................................... 4.0 g 

Dextrose ................................................................... 20.0 g

Le bouillon Acétamide est un milieu déshydraté utilisé pour la confirmation de Pseudomonas aeruginosa dans de l'eau embouteillée. 

Composition en gramme par L

• Acétamide : 2,0 g
• Sulfate de magnésium anhydre (MgSO4) : 0,2 g
• Phosphate monopotassique :1,0 g
• Molybdate de sodium (Na2MoO4, 2.H2O) : 5,0 mg
• Sulfate de fer (FeSO4, 7.H2O) : 0,5 mg
• Chlorure de sodium : 0,2 g
• Eau (exempte d’ammoniac) : 1000 mL 

Norme :  NF EN ISO 16266 et NF T90-421. 

Les milieux décarboxylase sont utilisés dans la différenciation biochimique des bacilles entériques gram-négatifs basée sur la production d'arginine dihydrolase et de lysine et ornithine décarboxylase.

Le milieu de base de la décarboxylase, additionné d'arginine, de lysine ou d'ornithine, est utilisé dans le même but. 

Le bouillon de lysine décarboxylase est utilisé pour différencier les micro-organismes sur la base de la décarboxylation de la lysine.

La solution TTC 1% Difco™ (Triphenyltetrazolium Chloride) est prête à l’emploi pour la préparation de milieu de culture.

La solution TTC 1% est préparée à partir de 2,3,5 triphenyltetrazolium chloride destinée à la microbiologie. Elle est utilisée comme un indicateur redox dans les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Chapman a expliqué que l’ajout de TTC à la gélose Tergitol™ permettait la détection et la confirmation de E. coli après seulement 10 heures d’incubation. Chapman a aussi expliqué que la gélose Tergitol 7 avec ajout de TTC donnait un milieu sélectif pour la détection et l’isolement de Candida albicans. Chapman ajoutait du TTC, Tergitol 7 et du pourpre de bromocrésol à la gélose Sabouraud au Malt pour l’isolement et l’identification de C. calbicans et autre champignon. Pagao, Levin et Trejo incorporaient du TTC dans la base Pagano Levin pour la détection et l’isolement des espèces de Candida.

Slanetz et Bartley utilisaient le TTC dans la gélose m-Enterococcus pour l’énumération des entérocoques. Sur ce milieu les colonies apparaissent de couleur rose à marron foncé. Kenner, Clark et Kabler utilisaient le TTC avec la gélose KF Streptococcus et le bouillon pour détecter et énumérer les streptocoques à la surface de l’eau.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

La solution TTC 1% est utilisée comme un indicateur redox pour les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Elle est incolore dans sa forme oxydée et est réduite en triphénylformazan par des systèmes réducteurs. La formation du formazan est une réaction irréversible. Une fois que le microorganisme réduit l’indicateur, la couleur rouge persiste.

L'oxgall est un additif pour la sélection des bactéries tolérantes à la bile.
L'oxgall est de la bile fraîche déhydratée.

Caractéristiques :
 - Inhibe la croissance des microorganismes à Gram positif.
- Fournit un approvisionnement régulier en bile
- Utilisé pour faciliter la détermination des agents pathogènes entériques.

L'Oxgall est fabriqué à partir de grandes quantités de bile fraîche par évaporation rapide de la teneur en eau.
La bile est composée d'acides gras, d'acides biliaires, de sels inorganiques, de sulfates, de pigments biliaires, de cholestérol, de mucine, de lécithine, d'acides glycuroniques, de porphyrines et d'urée.

Bouillon d'enrichissement de Listeria modifié par UVM Difco™

Le bouillon d'enrichissement de Listeria modifié par UVM est utilisé pour isoler rapidement Listeria monocytogenes.

Le Palcam Listeria agar est un milieu recommandé pour l'isolement et la différenciation de Listeria monocytogenes à partir d’échantillons cliniques ou alimentaires.

Préparation (pour 1 litre d'eau distillée ou déminéralisée):
Dissoudre 68,9 g dans 1L et porter lentement à ébullition sous agitation constante jusqu'à dissolution complète. Répartir en flacons de 100mL et autoclaver 15 min à 121 °C. 

Complément : ajouter stérilement 1 ml de supplément par flacon et mélanger au milieu refroidi à 50 °C. Couler dans des boîtes de Pétri stériles.
Incubation, 37 °C/24 à 48 h.

Composition :
Peptone : 23,0 g
Extrait autolytique de levure : 3,0 g
Amidon : 1,0 g
Chlorure de sodium : 5,0 g
D-mannitol : 10,0 g
Ammonium fer III citrate : 0,5
Esculine : 0,8 g
Glucose : 0,5 g
Chlorure de lithium : 15,0 g
Polymyxine B (sulfate) : 10,0 mg
Ceftazidime : 20,0 mg
Acriflavine : 5,0 mg
Rouge de phénol : 0,08 g
Agar agar : 10,0 g

pH final 7,2 ± 0,2 à 25°C

Certifiée NF Validation, sous attestation N°BKR 23/02 - 11/02.

Emulsion stérile de jaune d’œuf au tellurite de potassium pour gélose Baird-Parker pour le dénombrement des Staphylocoques à coagulase positive.

Composition:

Pour un flacon de supplément BS060 (50 mL):
- Emulsion de jaune d’œuf : 47,0 mL
- Tellurite de potassium à 3,5% : 3,0 mL