Milieux de culture

Pour l'isolement et la détection de Pseudomonas spp.

P.aeruginosa est un indicateur valable pour le contrôle de l'éfficacité des traitements de désinfection de l'eau. Ce paramètre est actuellement utilisé comme critère dans la régulation des pataugeoires et piscines. En plus de son rôle d'indicateur de propreté, P.aeruginosa est également recherché comme pathogène opportuniste dont la transmission est souvent associée à l'eau.
CHROMagar™ Pseudomonas fournit des résultats rapides et clairs pour la détection de Pseudomonas grâce à des couleurs de colonies différentielles. 

Lecture :

• Pseudomonas incluant P.aeruginosa
  • Bleu-vert
• Autres Gram (-)
  • Mauve à violet ou inhibé
• Bactéries Gram (+)
  • Majoritairement inhibé

La gélose sélective pour Bacillus cereus selon Mossel est utilisée pour la détection et le dénombrement des spores et formes végétatives de Bacillus cereus dans les produits alimentaires.

PREPARATION

• Mettre en suspension 44,5 g de milieu déshydraté (250.033969.54) dans 0,9 litre d’eau distillée ou déminéralisée.

• Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.

• Répartir en flacons à raison de 90 mL.

• Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.

• Refroidir et maintenir à 44-47 °C.

• Dans chaque flacon de 90 mL de milieu de base, ajouter stérilement 10 mL d’émulsion stérile de jaune d’œuf avec Polymyxine B (BS055).

• Homogénéiser parfaitement.

• Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide. NOTE : A la place de 10 mL d’émulsion stérile de jaune d’œuf à la polymyxine, il est possible d’ajouter 10 mL d’émulsion de jaune d’œuf (770.006608.02) et 1 mL de supplément polymyxine (supplément 77000070802 réhydraté avec 5 mL d’eau stérile)

Pour la détection des bactéries productrices de ß-Lactamases à spectre étendu.

Une défaillance à détecter rapidement des bactéries Gram (-) résistantes aux antibiotiques contribue à leur propagation incontrôlée, et parfois à des échecs thérapeutiques. Pour répondre à cette problématique, CHROMagar™ a développé un ensemble de suppléments sélectifs à ajouter à CHROMagar™ Orientation, spécialement conçus pour le dépistage des bactéries Gram (-) qui expriment différents types de résistances aux antibiotiques. 

Difco™ LB bouillon Miller

Ce bouillon est utilisé pour maintenir et propager Escherichia coli dans les procédures de biologie moléculaire.

C'est un milieu riche en nutriments conçus pour la croissance de cultures pures de souches recombinantes. E.Coli croît plus rapidement parce qu'ils fournissent aux cellules des acides aminés, précurseurs des nucléotides, vitamines et d'autres métabolites que le micro-organisme doit sinon synthétiser.

Composition (pour 1L de préparation):

Tryptone: 10,0g

Extrait de levure: 5,0g

Chlorure de sodium: 10,0g

C'est un supplément lyophilisé concentré de Tergitol nécessaire pour la fabrication du milieu TTC+Tergitol (réf 550.610184.54)

le milieu complet est utilisé dans l'isolement et le dénombrement de Escherichia coli et des coliformes dans l'eau par technique de filtration sur membrane recommandé par ISO 9308-1 .

COMPOSITION:

0,2g Tergitol/ flacon

Le bouillon Acétamide est un milieu déshydraté utilisé pour la confirmation de Pseudomonas aeruginosa dans de l'eau embouteillée. 

Composition en gramme par L

• Acétamide : 2,0 g
• Sulfate de magnésium anhydre (MgSO4) : 0,2 g
• Phosphate monopotassique :1,0 g
• Molybdate de sodium (Na2MoO4, 2.H2O) : 5,0 mg
• Sulfate de fer (FeSO4, 7.H2O) : 0,5 mg
• Chlorure de sodium : 0,2 g
• Eau (exempte d’ammoniac) : 1000 mL 

Norme :  NF EN ISO 16266 et NF T90-421. 

Supplément de sulfaméthazine

Un supplément lyophilisé à utiliser avec la base de gélose Baird Parker pour l'isolement et dénombrement de Staphylococcus aureus dans les denrées alimentaires et les aliments pour animaux conformément à la norme ISO 6888.

Tubes pour 500 ml de milieu.

Le bouillon Laxtose est un milieu de détection des salmonelles et des coliformes dans l'eau, l'alimentation, les produits laitiers et pharmaceutiques.

Bouillon de soja BBL ™ Trypticase ™ (bouillon de soja et de caséine)

Tryptic (Trypticase) Soy Broth (Soybean-Casein Digest Medium) est un support à usage général utilisé dans les procédures qualitatives de culture de microorganismes exigeants ou non, à partir d'une variété d'échantillons cliniques et non cliniques.

La gélose au Thiosulfate-Citrate-Bile-Saccharose (TCBS) constitue un milieu sélectif destiné à l’isolement de Vibrio cholerae et des autres vibrions entéropathogènes (en particulier Vibrio parahaemolyticus) dans les poissons, les produits de la mer et les autres prélèvements biologiques d’origine animale.

PREPARATION

- Refroidir et maintenir le milieu à 44-47°C.
- Couler en boîtes de Petri stériles.
- Laisser solidifier sur une surface froide.
- Faire sécher les boîtes à l’étuve, couvercle entrouvert.
- Ensemencer l’inoculum par étalement en surface.
- Incuber à 37°C pendant 18 à 24 heures, à l’abri de la lumière. 

COMPOSITION

Pour 1 litre de milieu

- Polypeptone : 10,0 g
- Extrait autolytique de levure : 5,0 g
- Saccharose : 20,0 g
- Bile de bœuf bactériologique : 5,0 g
- Cholate de sodium : 3,0 g
- Citrate de sodium : 10,0 g
- Thiosulfate de sodium : 10,0 g
- Chlorure de sodium : 10,0 g
- Citrate ferrique ammoniacal : 1,0 g
- Bleu de bromothymol : 40,0 mg
- Bleu de thymol : 40,0 mg
- Agar agar bactériologique : 14,0 g

pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 8,6 ± 0,2.