Milieux de culture

Pour l'isolement et la détection de Pseudomonas spp.

P.aeruginosa est un indicateur valable pour le contrôle de l'éfficacité des traitements de désinfection de l'eau. Ce paramètre est actuellement utilisé comme critère dans la régulation des pataugeoires et piscines. En plus de son rôle d'indicateur de propreté, P.aeruginosa est également recherché comme pathogène opportuniste dont la transmission est souvent associée à l'eau.
CHROMagar™ Pseudomonas fournit des résultats rapides et clairs pour la détection de Pseudomonas grâce à des couleurs de colonies différentielles. 

Lecture :

• Pseudomonas incluant P.aeruginosa
  • Bleu-vert
• Autres Gram (-)
  • Mauve à violet ou inhibé
• Bactéries Gram (+)
  • Majoritairement inhibé

Supplément sélectif chloramphénicol pour la détection et dénombrement des levures et moisissures.

Le supplément sélectif Chloramphénicol 50 mg, présenté sous forme lyophilisée, inhibe le développement de la plupart des contaminants bactériens, favorisant ainsi l’isolement et le dénombrement des levures et des moisissures.
Le supplément peut aussi être ajouté à la gélose Sabouraud (BK025) pour l’obtention de la gélose glucosée au chloramphénicol, existant en format déshydraté complet (BK007).

Préparation:

- Reprendre le lyophilisat en y ajoutant aseptiquement 3 mL d’eau distillée stérile, puis 2 mL d’acétone ou bien 5 mL d'une solution 1:1 éthanol / eau distillée stérile.
- Agiter le flacon plusieurs fois de façon à assurer une complète dissolution, tout en évitant la formation de mousse.
- Ajouter stérilement 1 mL de supplément sélectif à 110 mL de gélose glucosée à l'oxytétracycline OGA base (BK053) maintenue à 44-47°C ou à 100 mL de gélose de Sabouraud (BK025).
- Homogénéiser parfaitement.

Composition:

Chloramphénicol : 50,0 mg

Pour la détection des bactéries productrices de ß-Lactamases à spectre étendu.

Une défaillance à détecter rapidement des bactéries Gram (-) résistantes aux antibiotiques contribue à leur propagation incontrôlée, et parfois à des échecs thérapeutiques. Pour répondre à cette problématique, CHROMagar™ a développé un ensemble de suppléments sélectifs à ajouter à CHROMagar™ Orientation, spécialement conçus pour le dépistage des bactéries Gram (-) qui expriment différents types de résistances aux antibiotiques. 

Difco™ Pseudomonas Agar F

Pseudomonas Agar F, aussi connu sous le nom de Flo Agar, est utilisé pour l'amélioration de production de fluorescine.

Composition (pour 1L de préparation):

Digestat pancréatique de caséine ....................................... 10.0 g

Peptone protéique n°3............................................. 10.0 g

Phosphate dipotassique............................................... 1.5 g

Sulfate de magnésium ..................................................... 1.5 g

Agar ......................................................................... 15.0 g

POMME DE TERRE GLUCOSE GELOSE MERCK 10130-500G

Gélose glucosée de pomme de terre pour l’isolement, la culture et le dénombrement des Levures et Moisissures notamment dans les produits alimentaires.

Complément : acide tartrique à 10%.

Préparation :
Dissoudre 39 g/l. Autoclaver 20 minutes à 115 °C. Au moment de l’emploi ajouter 10 ml d’acide tartrique à 10% pour amener le pH à 3,5.

Composition :
Extrait de pomme de terre : 4,0
Glucose : 20,0
Agar agar : 15,0
pH final 5,6 ± 0,2

C'est un supplément lyophilisé concentré de Tergitol nécessaire pour la fabrication du milieu TTC+Tergitol 1,5% (réf 550.610184.54)

le milieu complet est utilisé dans l'isolement et le dénombrement de Escherichia coli et des coliformes dans l'eau par technique de filtration sur membrane recommandé par ISO 9308-1 .

COMPOSITION:

15g Tergitol/ flacon

L'agar Brucella est un milieu de culture pour la culture des organismes Brucella. Avec l'ajout de 5% de sang de cheval, le milieu est utilisé dans les procédures qualitatives pour l'isolement et la culture de micro-organismes non fastidieux et exigeants à partir d'une variété d'échantillons cliniques et non cliniques. Le bouillon Brucella est utilisé pour la culture des espèces de Brucella et pour l'isolement et la culture d'une grande variété de micro-organismes fastidieux et non fastidieux.

La solution TTC 1% Difco™ (Triphenyltetrazolium Chloride) est prête à l’emploi pour la préparation de milieu de culture.

La solution TTC 1% est préparée à partir de 2,3,5 triphenyltetrazolium chloride destinée à la microbiologie. Elle est utilisée comme un indicateur redox dans les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Chapman a expliqué que l’ajout de TTC à la gélose Tergitol™ permettait la détection et la confirmation de E. coli après seulement 10 heures d’incubation. Chapman a aussi expliqué que la gélose Tergitol 7 avec ajout de TTC donnait un milieu sélectif pour la détection et l’isolement de Candida albicans. Chapman ajoutait du TTC, Tergitol 7 et du pourpre de bromocrésol à la gélose Sabouraud au Malt pour l’isolement et l’identification de C. calbicans et autre champignon. Pagao, Levin et Trejo incorporaient du TTC dans la base Pagano Levin pour la détection et l’isolement des espèces de Candida.

Slanetz et Bartley utilisaient le TTC dans la gélose m-Enterococcus pour l’énumération des entérocoques. Sur ce milieu les colonies apparaissent de couleur rose à marron foncé. Kenner, Clark et Kabler utilisaient le TTC avec la gélose KF Streptococcus et le bouillon pour détecter et énumérer les streptocoques à la surface de l’eau.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

La solution TTC 1% est utilisée comme un indicateur redox pour les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Elle est incolore dans sa forme oxydée et est réduite en triphénylformazan par des systèmes réducteurs. La formation du formazan est une réaction irréversible. Une fois que le microorganisme réduit l’indicateur, la couleur rouge persiste.

Malt Extract Agar

Gélose extrait de malt est un milieu pour l'isolement, la culture et le dénombrement des levures et moisissures. Le pH acide du milieu permet la croissance optimale des levures et moisissures tout en limitant la croissance bactérienne.

Le bouillon de base TAT (avec ajout de polysorbate 20) est utilisé pour cultiver les microorganismes à partir de matériaux très visqueux ou gélatineux.