Milieux de culture

La gélose mannitol-sel (Mannitol Salt Agar) est utilisée pour l’isolement sélectif des staphylocoques et la détection des Staphylococcus aureus à partir d'échantillons cliniques.

PRINCIPE

La Mannitol Salt Agar est une préparation élaborée par Chapman pour différencier les staphylocoques coagulase positifs (ex. Staphylococcus aureus) des staphylocoques coagulase négatifs. Elle est utilisée pour isoler les staphylocoques provenant d’échantillons cliniques, de cosmétiques et pour les tests de dénombrement des microorganismes. Les peptones et l’extrait de bœuf présents dans la Mannitol Salt Agar apportent les éléments nutritifs essentiels. La concentration à 7,5 % du chlorure de sodium entraîne l’inhibition partielle ou complète des organismes bactériens autres que les staphylocoques. La fermentation du mannitol, signalée par un changement de l’indicateur au rouge de phénol, permet de différencier les espèces de staphylocoques. Les staphylocoques coagulase positifs (ex. Staphylococcus aureus) produisent des colonies de couleur jaune et une coloration jaune du milieu environnant, tandis que les staphylocoques coagulase négatifs produisent des colonies de couleur rouge et aucun changement de teinte de l’indicateur au rouge de phénol.

BD Milieu de culture déshydraté Difco™ : Base de gélose au sang Columbia, Hémolyse améliorée

Kit de détection de gaïacol

Détection des Alicyclobacilli spp. et des Alicyclobacilli qui forment le gaïacol 

Les alicyclobacilles sont des bactéries aérobies, acidophiles et thermophiles qui peuvent se développer dans les boissons très acides comme les jus de fruits, mais aussi dans les matières premières de ces boissons, comme les concentrés de jus de fruits ou le sirop de sucre. Grâce à leur capacité à former des spores, ils peuvent survivre au processus de pasteurisation et continuer à se développer de manière végétative dans des conditions optimales. Selon les résultats des recherches scientifiques, seuls 3 des quelque 40 alicyclobacilles connus sont capables de produire le gaïacol qui gâte les boissons avec son fort goût désagréable (odeur chimique intense).

La méthode de détection se déroule en 2 étapes. Tout d'abord, la contamination éventuelle est enrichie et isolée par culture avec nos milieux nutritifs prêts à l'emploi BAT Broth et Agar . Dans la deuxième étape, le kit de détection biochimique Guaiacol est utilisé pour analyser la bactérie Alicyclobacillus isolée et sa capacité à former du guaiacol.

Les milieux de culture BAT et le kit de détection de guaiacol sont décrits dans la méthode  de l'IFU n°12 (International Fruit and Vegetable Juice Association) « Méthode de détection et de dénombrement des bactéries thermo-acidophiles sporulées de détérioration »

POMME DE TERRE GLUCOSE GELOSE BK 095-500G

Gélose glucosée de pomme de terre pour l’isolement, la culture et le dénombrement des Levures et Moisissures notamment dans les produits alimentaires.

Complément : acide tartrique à 10%.

Dissoudre 39 g/l. Autoclaver 20 minutes à 115 °C. Au moment de l’emploi ajouter 10 ml d’acide tartrique à 10% pour amener le pH à 3,5.

Composition :
Extrait de pomme de terre : 4,0
Glucose : 20,0
Agar agar : 15,0
pH final 5,6 ± 0,2

Gélose APT Difco™ 

L'agar APT est utilisé pour cultiver des lactobacilles hétérofermentaires et d'autres organismes nécessitant une teneur élevée en thiamine. C'est aussi utilisé pour maintenir les cultures mères de Weissella (Lactobacillus) viridescens ATCC ™ 12706 utilisé dans le dosage de la thiamine.
 

BD Gélose Difco™, technique

Utilisée dans la préparation de milieu de culture microbiologique. La gélose BD™ Difco™, technique est un agent solidifiant avec des paramètres de contrôle de qualité plus larges que d’autres géloses bactériologiques. Cependant, la solubilité, la température de gélification et la solidité sont soigneusement surveillées afin de permettre son utilisation.

Le lait écrémé est utilisé pour la préparation de milieux de culture microbiologiques. Le milieu de lait écrémé peut être utilisé pour la culture et la différenciation de micro-organismes dans les aliments sur la base de la coagulation et de la protéolyse de la caséine.

Incuber les tubes avec des bouchons serrés pour les Clostridia et des bouchons desserrés pour les autres organismes, à 35° ± 2°C et lire à différents intervalles pendant 7 jours pour vérifier la croissance et les réactions.

L'Oxford Listeria agar est un milieu recommandé pour la détection de Listeria monocytogenes à partir d’échantillons cliniques et alimentaires.

Préparation :
Dissoudre 29,25 g dans 500 ml d’eau distillée. Porter à ébullition jusqu’à dissolution. Autoclaver 15 min à 121 °C. Refroidir à 50 °C et ajouter le supplément sélectif pour agar Oxford. Bien mélanger.
Incubation : 48 h à 37 °C.

Composition :
Gélose Columbia : 39,0
Esculine : 1,0
Citrate ammoniacal ferrique : 0,5
Chlorure de lithium : 15,0
pH final 7,0 ± 0,2

La gélose VRBL (gélose lactosée biliée au cristal violet et rouge neutre) est recommandée pour la recherche et le dénombrement des Coliformes dans les aliments et les produits pharmaceutiques.

Principe : la fermentation du lactose conduit à une acidification du milieu et au virage rouge de l'indicateur de pH (rouge neutre).

La dégradation des sels biliaires conduit à la formation d'une colonie rouge/violet.

Le cristal violet et les sels biliaires inhibent la croissance des bacteries Gram positifs.

Un coliforme formera une colonie caracteristique rouge entourée d'un halo violet après 24h d'incubation à 30°C

Livré avec certificat d'analyse comprenant les caractéristiques physiques et les essais de stérilité.

Composition :
Ingrédients en grammes pour un litre d'eau distillée ou déminéralisée.
Peptone : 7,00
Chlorure de sodium : 5,00
Extrait de levure : 3,00
Rouge neutre : 0,03
Sels biliaires : 1,50
Cristal violet : 0,002
Glucose : 10,00
Agar : 13,00
pH final : 7,4 ± 0,2 à 25°C 

Norme : ISO21528-1:2004

Le Bacto™ Tryptic Soy Broth (Soybean-Casein Digest Medium) est un milieu d’usage général utilisé dans les procédures qualitatives pour la culture de microorganismes fastidieux et non-fastidieux à partir d’une variété de spécimens cliniques et non cliniques.