Milieux de culture

Le CHROMagar™ mSuperCARBA™ est un milieu de culture chromogène sélectif et différentiel, destiné à être utilisé dans la détection qualitative directe d’une colonisation gastro-intestinale par des entérobactéries résistantes aux carbapénèmes (ERC), y compris les producteurs d’OXA-48. Il aide à la prévention et au contrôle des ERC dans les établissements de santé. Le test est realisé à partir d’un écouvillon rectal et d’échantillons de selles du patient pour dépister la colonisation ERC. Les résultats peuvent être interprétés après 18-24 h d’incubation en aérobie à 35-37 °C. CHROMagar™ mSuperCARBA™ n’est pas destiné à diagnostiquer une infection ERC ni à guider ni à surveiller le traitement des infections. Un manque de croissance ou l’absence de colonies sur CHROMagar™ mSuperCARBA™ n’exclut pas la présence de CRE.

Apparence des colonies typiques

• E. coli EPC* → rose foncé à rougeâtre
• Coliformes EPC → bleu métallique
• Pseudomonas OPC* → translucide, +/-pigmentation naturelle crème à vert
• Acinetobacter OPC → crème
• Autres Gram (-) OPC → incolores, pigmentation naturelle
• E. coli/Coliformes non[1]EPC → inhibé
• Autres Gram (-) non-OPC → inhibé
• Bactérie Gram (+) → inhibé *

EPC : Entérobacterie productrice de carbapénèmes. *OPC : Organisme producteur de carbapénème

La gélose GSP Kielwein est un milieu de culture pour la détection des Pseudomonas et des Aeromonas dans les denrées alimentaires ainsi que dans les eaux usées.

La gélose GSP Kielwein est une gélose au glutamate d'amidon et au phénol rouge.
Le glutamate et l'amidon est la seul source de nutriment.
L'amidon est dégradé par Aeromonas, la production d'acide est mis en évidence par le rouge de phénol gâce à son virage vers le jaune, mais pas par Pseudomonas.

Composition du milieu GSP Kielwein pour 1L :
- Sodium Glutamate : 10,0 g/L
- Amidon soluble : 20,0 g/L
- Potassium hydrogenophosphate : 2,0 g/L
- Magnésium sulfate : 0,5 g/L
- Rouge de phénol : 0,36 g/L
- Agar : 12,0 g/L

Solution antimousse pour une utilisation avec Colilert-18, Colisure, Pseudalert et Quanti-Tray pour empêcher la formation de mousse lors du mélange de l'échantillon avec les réactifs Idexx. 

Le supplément GENTAMYCIN est un supplément sélectif lyophilisé constitué de Gentamycine à utiliser comme supplément du milieu de culture de la morue SABOURAUD AGAR pour l'isolement des levures et des moisissures.

Mode d'emploi

- Reprendre le lyophilisat en y ajoutant aseptiquement 5 mL d’eau distillée stérile.

- Agiter le flacon plusieurs fois de façon à assurer une complète dissolution, tout en évitant la formation de mousse.

- Ajouter stérilement 2 mL de supplément sélectif à 100 mL de gélose glucosée au chloramphénicol (250.033767.54) maintenue à 44-47 °C.

- Homogénéiser parfaitement.

Pour la détection de Malassezia spp.

Malassezia est un champignon naturellement présent sur les peaux humaines et animales. Sur une peau saine, il ne provoque pas d'infection, mais lorsque la peau est altérée, les Malassezia sont à l'origine de diverses maladies cutanées comme la dermatite ou l'otite. 
CHROMagar™ Malassezia a été développé dans le but de non seulement faciliter la détection mais aussi d'améliorer l'algorithme de différenciation des différentes espèces. 

Lecture :

• Malassezia furfur
  • Large, rose pâle et rugueux
• Autres Malassezia spp incluant M.globosa et M.restricta
  • Principalement rose à violet

Gélose VFSR avec 2 g/L d'extrait de levure, pour le dénombrement des spores de bactéries anaérobies sulfito-réducteurs.

La gélose glucosée viande-foie pour sulfito-réducteurs (VFSR) avec 2 g/L d’extrait de levure est utilisée pour le dénombrement des spores de bactéries anaérobies sulfito-réducteurs dans les matières premières et ingrédients entrant dans la composition des conserves non acides (pH>4,5), ainsi que les prélèvements de surface et dans les eaux de process des conserveries. 
Elle peut être utilisée aussi pour le dénombrement des spores dans les produits pasteurisés.

Préparation :

- En conserverie, chauffer le produit à analyser 10 minutes à 95-100 °C.
- Pour les produits pasteurisés, chauffer 10 min à 80 ± 2 °C pour la recherche de Bacillus cereus et des anaérobies sulfito-réducteurs ; 10 min à 75 ± 2 °C pour la recherche des Clostridium butyriques ; 10 min à 95-100 °C pour la recherche des Bacillus et Clostridium thermophiles.
- Faire fondre le milieu prêt-à-liquéfier (BM169) pendant le minimum de temps nécessaire à sa reliquéfaction totale.
- Refroidir et maintenir à 44-47°C.
- Transférer 1 mL de la suspension traitée thermiquement et de ses dilutions décimales successives dans des boîtes de Petri stériles.
- Couler environ 15 mL de milieu, par boîte.
- Homogénéiser parfaitement et laisser solidifier sur une surface froide.
- Ajouter une couche de 5 à 10 mL du même milieu de manière à former une deuxième couche et laisser solidifier.
- Incuber dans les jarres pour anaérobiose : à 37 ± 1 °C pendant 48 ± 3 heures, pour les bactéries anaérobies mésophiles.
ou à 55 ± 1 °C pendant 5 jours, pour les bactéries anaérobies thermophiles, en prenant soin de couler dans le couvercle des boîtes quelques gouttes d’huile de paraffine stérile pour assurer l’étanchéité. 

Composition:

Pour 1 litre de milieu :
- Peptone viande-foie : 30,0 g
- Glucose : 2,0 g
- Extrait de levure : 2,0 g
- Amidon soluble : 2,0 g
- Sulfite de sodium : 2,5 g
- Citrate de fer ammoniacal : 0,5 g
- Agar agar bactériologique : 12,0 g

pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25 °C : 7,6 ± 0,2.  

Le milieu EC avec MUG est utilisé pour détecter Escherichia coli dans l'eau, les aliments et le lait.

Les géloses BCYE avec cystéine et BCYE sans cystéine sont utilisées pour la confirmation des colonies présomptives de Legionella spp. dans les échantillons d’eau et les autres prélèvements susceptibles d’en contenir.

La gélose BCYE avec cystéine peut également être utilisée pour le dénombrement des Legionella spp. dans les échantillons d’eau.

La formule-type des géloses répond à la composition définie dans les normes pour le contrôle des eaux NF EN ISO 11731 et NF T 90-431.

EAU PEPTONEE TAMPONNEE 6X90ML

L’eau peptonée tamponnée est un diluant couramment utilisé pour la préparations des échantillons de produits alimentaires. La concentration double en tampons permet de l’utiliser avec des produits très acides ou alcalins.

FORMULE

Ingrédients en grammes pour un litre d'eau distillée ou déminéralisée. 

• Peptone de caséine 10,00
• Chlorure de sodium 5,00
• Phosphate de sodium, dibasique, 3,50
• Phosphate de potassium, dibasique 1,50
• pH final à 25°C : 7,0 /+- 0,2

Normes : ISO6579:2002 / ISO21528 / ISO 6887 / ISO 11290

SIMPLATE POUR HPC - SUBSTRAT + SIMPLATE-UNITE DOSE-PACK DE 25

SimPlate pour HPC est une méthode simple pour déterminer la numération des bactéries hétérotrophes dans l'eau. La méthode est équivalente à la numération sur milieu gélosé. Les puits positifs deviennent fluorescents sous la lumière ultraviolette.