Milieux de culture

La novobiocine, un inhibiteur de Hsp90, est utilisée pour étudier l'inhibition des protéines de choc thermique et pour produire de l'ADN plasmidique surenroulé positif.

Pour la production d'ADN plasmidique positivement surenroulé. Inhibiteur de l'ADN gyrase bactérien et de l'ADN topoisomérase eucaryote. Inhibiteur de l'ADN-polymérase ARN-dépendante des rétrovirus.

Le supplément BRUCELLA  est un supplément sélectif pour l’isolement de Brucella spp à partir du lait.
Le supplément sélectif est constitué d’un mélange lyophilisé d’antibiotiques: Polymyxine B, Bacitracine, Cycloheximide, Acide nalidixique, Nystatine, Vancomycine.
Le supplément BRUCELLA est employé pour l’enrichissement sélectif des milieux Brucella Agar Base, Columbia Agar Base, Blood Agar Base.

La croissance lente des espèces de Brucella requiert la présence, dans le milieu, d’agents sélectifs qui préviennent la croissance excessive des microorganismes contaminants présents dans l’échantillon à étudier. 

Composition du supplément BRECELLA :
- Polymyxine B est un antibiotique à large spectre
- Bacitracine interfère avec la synthèse de la paroi bactérienne et elle est essentiellement active sur les bactéries à Gram positif
- Cycloheximide et la Nystatine ont une activité antifongique
-  Acide nalidixique est une quinolone active contre les bactéries à Gram négatif
-  Vancomycine inhibe la synthèse de la paroi cellulaire des bactéries à Gram positif

Dichloran Glycerol (DG18) Agar

Dichloran Glycerol (DG18) Agar est un milieu utilisé pour l'isolement sélectif et le dénombrement des levures et moisissures dans les aliments.
Ce milieu est conforme à la norme ISO 21527-2 pour l'examen microbiologique des produits ayant une activité de l'eau inférieur ou égal à 0,95 tels que fruits secs, gâteaux, confitures, viande séchée, poisson salé, céréales, produits céréaliers, farine, noix, épices et condiments, etc.

Le Bouillon d’enrichissement recommandé pour la recherche d’E. coli. 0157 : H7 dans les produits alimentaires tout particulièrement dans les produits laitiers.

Préparation :
Dissoudre 36,7 g/litre d’eau déminéralisée. Autoclaver à 121 °C/15 min.

Emploi :
Inoculer le bouillon E.C. modifié avec l'échantillon à tester (généralement 25 g de l'échantillon dans 225 ml de bouillon). Incuber à 35-37 °C/18 à 24 h. Ensuite ensemencer 0,1 ml de ce bouillon sur un agar sélectif pour E.COLI 0157 : H7.

Composition :
Peptones : 20,0
Chlorure de sodium : 5,0
Sels bilaires n°3 : 1,12
Lactose : 5,0
Di-potassium hydrogénophosphate : 4,0
Di-hydrogénophosphate potassium : 1,5
Novobiocine : 0,02
pH final 7,0 ± 0,2 à 25 °C

La gélose de base Clostridium perfringens est un milieu utilisé seul ou avec des agents sélectifs pour l'identification présomptive de Clostridium perfringens provenant d'échantillons cliniques, d'aliments, d'eau et d'échantillons environnementaux.

La D-Cyclosérine peut être ajoutée à ce milieu de culture pour se conformer aux spécifications données par l'ISO 7937, l'ISO 14189 et l'APHA.

Lorsqu'il est complété avec de la polymyxine B et de la kanamycine, le milieu est conforme à la formulation développée par Shahidi et Ferguson.

S'il est utilisé sans supplément ajouté, ce milieu est connu sous le nom de gélose au sulfate de fer et est recommandé par l'ISO 15213 pour le dénombrement de bactéries sulfito-réductrices poussant dans des conditions anaérobies.

Trypticase Soja Agar BD™

Trypticase Soja Agar BD™ (TSA) est un milieu à usage général est utilisée pour l'isolement et la culture de microorganismes exigeants ou non. 
Il n'est pas recommandé de l'utiliser pour l'isolement primaire de micro-organismes à partir d'échantillons cliniques, mais peut être utilisé pour la sous-culture de souches bactériennes isolées à partir d'échantillons cliniques afin d'obtenir des cultures pures et pour une différenciation et une identification supplémentaires.

Composition (pour 1Litre) :

Digest pancréatique de caséine 15,0 g
Digest papaic de soja 5.0
Chlorure de sodium 5,0
Gélose 15,0
pH 7,3 ± 0,2

Sels de mer

NutriSelect™ Basic

Le sel marin est un sel non raffiné, qui est récolté dans l'océan et dans les gisements d'eau salée. Il est utilisé pour maintenir l'équilibre en sel de l'organisme.

Habituellement utilisé à environ 40 g/L pour la culture des bactéries marines.
Après dissolution, ajuster le pH à 8,2 en utilisant une solution 0,1 N d'hydroxyde de sodium ou d'acide chlorhydrique.

Gélose R2A Merck - 500g

La gélose R2A est un milieu nutritif pour la détermination du nombre total de bactéries hétérotrophes dans l'eau potable.
C'est un milieu à faible teneur en nutriments qui, associé à une température d'incubation basse et un temps d'incubation prolongé, est particulièrement adapté à la récupération des bactéries stressées et tolérantes au chlore de l'eau potable. Le milieu nutritif est conforme aux recommandations des méthodes standards (USEPA) et de la Pharmacopée Européenne (2014) pour l'examen des eaux.

Mode d'action

La faible concentration d'extrait de levure, d'hydrolisat de caséine, de peptone et de glucose permet à un large spectre de bactéries de se développer sans que les bactéries à croissance rapide suppriment les espèces à croissance lente, comme ce serait le cas sur des milieux riches en nutriments comme par ex. Gélose PCA.
La teneur en amidon et en pyruvate permet notamment aux bactéries lésées de se développer à nouveau plus rapidement.

Composition :

Extrait de levure : 0,5 g/L
Protéose Peptone : 0,5 g/L
Hydrolysat de caséine : 0,5 g/L
Glucose : 0,5 g/L
Amidon soluble : 0,5 g/L
Pyruvate de sodium : 0,3 g/L
K2HPO4 : 0,3 g/L
MgSO4, anhydre : 0,024 g/L
Agar-Agar : 15 g/L

Préparation :

1. Suspendre 18,2 g dans 1 L d'eau déminéralisée et chauffer au bain-marie bouillant ou à la vapeur jusqu'à dissolution complète du milieu.
2. Autoclaver 15 min à 121°C.
3. Refroidir à 45–50 °C et verser dans des boîtes de Pétri stériles.
4. L'aspect du milieu est clair à légèrement trouble et jaunâtre.

La valeur du pH à 25 °C est comprise entre 7,0 et 7,4.

JAUNE D'OEUF TELLURITE EMULS OXOID SR0054C-100ML

Le jaune d'oeuf au tellurite est un ingrédient pour milieu de Baird Parker.
Dose d’emploi 5 ml pour 100 ml de milieu.
Conservation de 2 à 8 °C à l'obscurité.

Le GLUCOSE est utilisé comme une source d'énergie pour la croissance bactérienne.
Plus particulièrement pour les bactéries pour les tests de fermentation  (Salmonellatyphimurium et Escherichia coli fermentent le glucose).

 Dans les milieux liquides, on utilise généralement une concentration de 0,5 % .
Pour les géloses, des concentrations élevées sont utilisées pour la préparation de milieu de culture.