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Un milieu de culture est une préparation utilisé en microbiologie, avec divers composants qui reproduisent un environnement propice au développement de micro-organismes (levures, bactéries, moisissures, cellules). Il existe une grande variété de milieux de culture qui sont utilisés pour produire, conserver, isoler ou identifier certains micro-organismes.

 

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  1. R2A GELOSE MERCK 416-500G

    Réf.: 211865  145.000416.54

    Gélose R2A Merck - 500g

    La gélose R2A est un milieu nutritif pour la détermination du nombre total de bactéries hétérotrophes dans l'eau potable.
    C'est un milieu à faible teneur en nutriments qui, associé à une température d'incubation basse et un temps d'incubation prolongé, est particulièrement adapté à la récupération des bactéries stressées et tolérantes au chlore de l'eau potable. Le milieu nutritif est conforme aux recommandations des méthodes standards (USEPA) et de la Pharmacopée Européenne (2014) pour l'examen des eaux.

    Mode d'action

    La faible concentration d'extrait de levure, d'hydrolisat de caséine, de peptone et de glucose permet à un large spectre de bactéries de se développer sans que les bactéries à croissance rapide suppriment les espèces à croissance lente, comme ce serait le cas sur des milieux riches en nutriments comme par ex. Gélose PCA.
    La teneur en amidon et en pyruvate permet notamment aux bactéries lésées de se développer à nouveau plus rapidement.

    Composition :

    Extrait de levure : 0,5 g/L
    Protéose Peptone : 0,5 g/L
    Hydrolysat de caséine : 0,5 g/L
    Glucose : 0,5 g/L
    Amidon soluble : 0,5 g/L
    Pyruvate de sodium : 0,3 g/L
    K2HPO4 : 0,3 g/L
    MgSO4, anhydre : 0,024 g/L
    Agar-Agar : 15 g/L

    Préparation :

    1. Suspendre 18,2 g dans 1 L d'eau déminéralisée et chauffer au bain-marie bouillant ou à la vapeur jusqu'à dissolution complète du milieu.
    2. Autoclaver 15 min à 121°C.
    3. Refroidir à 45–50 °C et verser dans des boîtes de Pétri stériles.
    4. L'aspect du milieu est clair à légèrement trouble et jaunâtre.

    La valeur du pH à 25 °C est comprise entre 7,0 et 7,4.

    250,00 € HT
  2. MUELLER HINTON BOUILLON FASTIDIQUE - 3,6ML - PACK X20

    Réf.: 275772

    Mueller Hinton Bouillon Fastidieux - 3,6ml - Pack x20 - Tests de sensibilité antimicrobienne pour organismes fastidieux

    Le Mueller Hinton Bouillon Fastidieux est un milieu liquide conçu pour la détermination de la CMI des organismes fastidieux. Ce pack de 20 tubes, chacun contenant 3,6ml de bouillon, est idéal pour les tests de sensibilité antimicrobienne (AST) des bactéries exigeantes isolées d'échantillons cliniques. Recommandé par l'EUCAST, il est essentiel pour les laboratoires de microbiologie clinique effectuant des tests sur Streptococcus spp., Haemophilus influenzae, et autres organismes fastidieux.

    Le Mueller Hinton Bouillon Fastidieux (MH-F) est un milieu de culture liquide spécialement formulé pour les tests de sensibilité antimicrobienne (AST) des bactéries fastidieuses. Il est utilisé pour la détermination de la Concentration Minimale Inhibitrice (CMI) par la méthode de microdilution en bouillon, conformément aux recommandations de l'European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST).

    Ce milieu est composé de Mueller Hinton cation-ajusté, supplémenté avec 5% de sang de cheval lysé et 20 mg/L de β-NAD, fournissant les nutriments nécessaires à la croissance des organismes exigeants. Il est particulièrement adapté pour les tests sur Streptococcus spp. (incluant S. pneumoniae), Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Listeria monocytogenes, Campylobacter jejuni et coli, Pasteurella multocida, Corynebacterium spp., Aerococcus sanguinicola et urinae, Kingella kingae, et d'autres organismes fastidieux.

    L'extrait de viande et l'hydrolysat acide de caséine fournissent des acides aminés, des composés azotés, des minéraux, des vitamines, du carbone et d'autres nutriments essentiels. L'amidon agit comme un colloïde protecteur contre les substances toxiques et fournit une petite quantité de glucose. Le sang de cheval et le β-NAD assurent une supplémentation de croissance supplémentaire pour les micro-organismes exigeants.

    Les procédures de dilution en bouillon (macrodilution et microdilution) sont utilisées pour mesurer quantitativement l'activité in vitro d'un agent antimicrobien contre un isolat bactérien donné. Le milieu n'est pas destiné à l'inoculation directe d'échantillons biologiques ; il doit être inoculé avec des souches pures obtenues par culture sur plaque de Petri.

    94,50 € HT
  3. EXTRAIT DE BOEUF DESHYDRATE LF 610497 - 500G

    Réf.: 246519  550.610497.54

    L'Extrait de boeuf est un extrait déshydraté de tissu bovin utilisé pour préparer des milieux de culture microbiologique. 

    L'extrait de boeuf est généralement utilisé à une concentration de 0,3 % dans les milieux de culture. 
    L'extrait de boeuf est utilisé dans la composition des milieux de culture déshydratés et doit être dissous dans de l'eau distillée ou déionisée et
    la stérilisation par autoclave. 

    63,00 € HT
  4. RCM HIRSCH GRINSTED GELOSE BK 090-500G

    Réf.: 235506  250.033822.54

    Gélose RCM de Hirsch Grinsted BIOKAR – 500G

    La gélose RCM (Reinforced Clostridial Medium) est un milieu non sélectif utilisé pour la culture, l’isolement et la numération des Clostridia, des autres germes anaérobies, des Lactobacilles dans les prélèvements biologiques, les produits laitiers et les autres produits alimentaires.

    Composition : 
    Pour 1L de milieu

    Tryptone : 10,0 g
    Extrait de viande : 10,0 g
    Extrait autolytique de levure : 3,0 g
    Cystéine (chlorhydrate) : 0,5 g
    Glucose : 5,0 g
    Amidon soluble : 1,0 g
    Chlorure de sodium : 5,0 g
    Acétate de sodium : 3,0 g
    Agar agar bactériologique : 15,0 g
    pH final à 25°C : 6,8 ± 0,2

    Préparation :

    1. Mettre en suspension 52,5 g de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
    2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
    3. Répartir en tubes ou en flacons.
    4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
    5. Refroidir et maintenir à 44-47 °C.
    100,40 € HT
  5. ROUGE DE PHENOL MANNITOL GELOSE BD 210310 - 500G

    Réf.: 239818  416.210310.54

    La gélose au Rouge de phénol et au Mannitol permet de mettre en évidence les bactéries basées sur des réactions de fermentation du mannitol.

    L'avantage d'un milieu de fermentation solide est qu'il permet d'observer la fermentation du mannitol en conditions aérobies et anaérobies.

    Composition pour une préparation de 1 Litre :
    Protease Peptone : 10 g
    Extrait de boeuf : 1 g
    D-Mannitol : 10 g
    Chlorure de Sodium : 5 g
    Agar : 15 g
    Rouge de phénol : 25 mg

    Le peptone fournit le carbone et l'azote nécessaires à une bonne la croissance d'une grande variété d'organismes.
    Chlorure de sodium maintient l'équilibre osmotique du milieu.
    L'agar est l'agent solidifiant.
    Le rouge de phénol est l'indicateur de pH, en virant de rouge-orange à jaune lorsque de l'acide est produit pendant la fermentation.
    Le milieu reste rouge ou devient alcalin (rouge plus foncé).

     

    325,30 € HT
  6. SABOURAUD DEXTROSE BOUILLON 6X100ML

    Réf.: 246450  550.402040.02

    BOUILLON DEXTROSE SABOURAUD

    Le bouillon de dextrose de Sabouraud (SDB) est un milieu liquide Le bouillon de dextrose de Sabouraud (SDB) est un milieu liquide recommandé pour une utilisation dans les procédures qualitatives pour l'isolement de levures et de moisissures et pour la culture ou la sous-culture de champignons à partir d'échantillons cliniques et non cliniques spécimens.
    Ce milieu est conforme aux exigences de la méthode harmonisée de la pharmacopée des États-Unis
    (USP), la Pharmacopée Européenne (EP) et la Pharmacopée Japonaise (JP) pour l'examen microbiologique des
    produits non stériles.

    26,55 € HT
  7. SALMONELLA SHIGELLA GELOSE LF 610042 - 500 G

    Réf.: 246177  550.100007.21
    56,25 € HT
  8. TSYE GELOSE LF 620349 - 100 G

    Réf.: 246245  550.100007.89
    25,20 € HT
  9. CAMPYLOBACTER GELOSE LF 621007 - 100 G

    Réf.: 245914  550.100004.58
    16,65 € HT
  10. POMME DE TERRE DEXTROSE GELOSE LF 6101025 - 5 KG

    Réf.: 246142  550.100006.86
    449,40 € HT

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On retrouve 4 principaux types de milieux :

  • Les milieux standards qui permettent la croissance des micro-organismes sans besoin particulier, tel que PCA (Plate Count Agar), TSA (Tryptic Soy Agar) ou bouillon nutritif.
     
  • Les milieux enrichis sont caractérisés par l’ajout d’un composé particulier permettant la croissance de micro-organismes exigeant ce composé qui peut être du sang, du sérum, du jaune d’œuf, du lait …
     
  • Les milieux sélectifs permettent la croissance d’une espèce de micro-organismes et donc son isolement, tandis que les autres espèces sont inhibées. Un milieu de culture est rendu sélectif pour une espèce microbienne lorsque sont seules satisfaites les exigences nutritives et les conditions de développement particulières à cette espèce. Les principaux facteurs de sélection microbienne utilisés seuls ou en association sont : la température d'incubation, le pH du milieu, la faculté d'utiliser une source nutritive déterminée (azote, carbone, …) et la résistance à l'action bactéricide d'un antiseptique ou d'un antibiotique.
     
  • Les milieux de culture chromogènes permettent l’identification précise de micro-organismes par coloration des colonies. Le principe de ce milieu, repose sur la présence d'un ou plusieurs substrats chromogènes permettant la coloration des colonies à la suite de sa dégradation par des enzymes bactériennes spécifiques et de la libération du chromophore.

Les milieux de culture sont disponibles soit sous forme déshydratée en poudre ou prêt à l’emploi en bouillon ou gélose. Les milieux sont solidifiés grâce à la présence d’agar pour l’obtention d’une gélose, tandis que les bouillons n’en contiennent pas.

Milieux de culture déshydratés

Le format déshydraté assure une composition constante du milieu et un stockage simplifié, car il n’est pas nécessaire de le conserver réfrigéré.
Pour l’utilisation, il est nécessaire de le reconstituer en mélangeant la poudre avec un volume d’eau préconisé, l’homogénéiser, le dissoudre par chauffage et le répartir dans des flacons ou des tubes en verre en vue d’être stérilisé par autoclavage. Une fois refroidi, le milieu de culture peut être additionné d’un supplément qui ne supporte pas l’autoclavage, et ensuite il peut être distribué dans des tubes ou des boîtes de pétri.

Milieux de culture prêts à l’emploi

L’avantage du format prêt à l’emploi c’est qu’il n’y a pas de préparation préalable à réaliser, hormis la remise en surfusion pour liquéfier le milieu et le distribuer dans des tubes ou des boîtes de pétri. Par contre ce type de milieux possède une durée de conservation beaucoup plus courte que les milieux déshydratés et le stockage est plus complexe.

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