Milieux de culture

Emulsion stérile de jaune d’œuf à la Polymyxine B pour gélose sélective pour le dénombrement de Bacillus cereus selon Mossel.

Préparation:

- Dans chaque flacon de 90 mL de milieu de base, ajouter stérilement 10 mL d’émulsion stérile de jaune d’œuf avec Polymyxine B (BS055).
- Homogénéiser parfaitement.
- Couler en boîtes de Petri stériles et laisser solidifier sur une surface froide.

Composition:

- Polymyxine B (sulfate) : 5x10^4 UI
- Emulsion stérile de jaune d’œuf : 50,0 mL

Lactose bouillon solide, 500 gr.

Germes recherchés :

• Coliformes
• Salmonelles
• Etude de la fermentation du lactose des bactéries

La gélose glucosée à l’oxytétracycline est utilisée pour le dénombrement des levures et des moisissures dans les produits alimentaires. 

La formule-type répond à la composition définie dans les normes ISO 6611 et NF V08-059.

Ce milieu est une modification du milieu PCA classique (Plate Count Agar) dans lequel le glucose est supprimé. Il est utilisé en bactériologie des eaux pour le dénombrement des microorganismes revivifiables par comptage des colonies à 36 et 22°C.

Livré avec certificat d'analyse comprenant les caractéristiques physiques et les essais de stérilité.

Composition :
Ingrédients en grammes pour un litre d'eau distillée ou déminéralisée.
Peptone de caséine : 6,00
Extrait de levure : 3,00
Agar : 15,00
pH final : 7,0 ± 0,2  à 25°C

MOSSEL Bouillon (selon EP/USP/JP harmonisée)

Bouillon d'enrichissement d'Enterobacteriaceae - Mossel est conçu pour l'enrichissement sélectif des bactéries tolérantes à la bile, Gram négatif.

Le milieu est utilisé pour les tests de stérilité des substances, préparations et produits ainsi que pour un bouillon de pré-enrichissement pour le test de micro-organismes spécifiés ou pour les déterminations de la numération aérobie viable totale en utilisant la méthode MPN dans les produits pharmaceutiques non stériles.
Ce milieu de culture est conforme aux spécifications données par les méthodes harmonisées EP, USP, JP
pour l'examen microbien des produits non stériles: test de dénombrement microbien et tests pour Microorganismes.
Mode d'action:
Le glucose améliore la croissance de toutes les entérobactéries lactose positives et négatives. Les indésirables,
la flore bactérienne qui l'accompagne est presque complètement inhibée par la bile verte brillante et la bile de bœuf. Le fort
pouvopir tampon du milieu empêche l'acide produit d'inhiber la culture.

Gélose lactosée au désoxycholate à 0,5 g/l pour la recherche et le dénombrement des Coliformes.

Préparation:

Dissoudre 40 à 42,5 g/l. Faire bouillir 2 minutes. Ne pas autoclaver.

Incubation 18 à 24 h à 30 ou 37 °C.

Composition:

Peptone de viande : 10,0
Lactose : 10,0
Chlorure de sodium : 5,0
Désoxycholate de sodium : 0,5
Citrate de sodium : 2,0
Rouge neutre : 0,033
Agar agar : 12,5 à 15,0
pH final 7,1 ± 0,2 à 25 °C

La base bouillon Fraser est utilisée avec le supplément pour bouillon Fraser dans l’enrichissement sélectif et la détection de Listeria.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

Les peptones, les extraits de bœuf et de levure fournissent l’azote, les vitamines et les minéraux. Le phosphate de sodium et le phosphate de potassium sont les agents tampon. La différenciation est facilitée par l’inclusion du citrate d’ammonium dans le milieu final. Comme toutes les espèces de Listeria hydrolysent l’esculine, l’ajout d’ions ferriques au milieu détectera la réaction. Un noircissement du milieu par les cultures contenant des bactéries est le résultat de la formation de 6,7-dihydroxycoumarine qui réagit avec les ions ferriques.

La sélectivité est assurée par la présence de chlorure de lithium, d’acide nalidixique et d’acriflavine dans la formule. La haute tolérance au sel de Listeria est utilisée comme moyen pour inhiber la croissance des entérocoques.

La base de milieu Oxford est utilisée pour préparer le milieu Oxford ou le milieu Oxford modifié pour isoler et différencier Listeria monocytogenes

Le Cetrimid permet l’isolement et la différenciation de Pseudomonas aeruginosa dans divers produits.

Dissoudre 44,5 g/l
Ajouter 10 ml de glycérol p.a
Autoclaver à 121 °C/15 min
Couler en boîte

Composition:
Peptone de gélatine : 20,0
Magnésium chlorure : 1,4
Potassium sulfate : 10,0
Bromure de N céthyl-N, N, N thriméthyl-ammonium (cétrimide) : 0,3
Agar agar : 13,0
pH final 7,2 ± 0,2

Lecture :
Après étalement du produit à analyser en surface du milieu et incubation à 42 °C/48 h à l'aide d'une lampe U.V, les colonies de Pseudomonas aeruginosa apparaissent fluorescentes.